Efecto de la inhibición de TGF-ß sobre la Expresión de citoquinas hematopoyéticas en Células madre mesenquimales de tejido adiposo Humano (hasc).

TANIA M. RODRÍGUEZ; ALEJANDRA CARREA; MILAGROS PENA; ALEJANDRO SALDIAS; MARCELO IRIGO; RAUL GALLO; MARCELO J. PERONE; RICARDO A. DEWEY

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2012

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

La expansión ex vivo de las células madre y progenitores hematopoyéticos (HSPCs) requiere citoquinas que favorezcan su proliferación. Una estrategia se basa en el cocultivo con células madre mesenquimales. Éstas, secretan citoquinas hematopoyéticas (CH) que contribuyen a la multiplicación de las HSPCs y TGF-b, entre otros factores. Se sabe que TGF-b es un inhibidor de la proliferación de HSPCs. Nuestros estudios previos demostraron que en hASCs TGF-b1 disminuye la expresión de TPO, SCFa y b, IL-6 e IL-3, por otra parte aumenta la expresión de GCSF y LIF, mientras que FL y GM-CSF no se ven afectadas. Ahora, evaluamos los perfiles de expresión de CH por qPCR en hASCs insensibles a TGF-b. Para ello, las células fueron transducidas con un vector lentiviral bicistrónico que codifica un mutante dominante negativo del receptor tipo II de TGF-b (TBRII) y eGFP (Lt-TBRII-DN). Luego de la transducción y para trabajar con poblaciones altamente enriquecidas (90%), las hASC fueron purificadas utilizando un cell sorter. Inicialmente, en estudios de diferenciación in vitro, pudimos establecer que la inhibición de la cascada de TGF-B en hACS no afecta su multipotencialidad. Posteriormente, se analizaron los perfiles de expresión de un panel 9 CH (TPO, SCFa y b, FL, IL-6, IL-3, G-CSF, LIF y GM-CSF). De esta manera pudimos documentar que en ASC insensibles a TGF-B con respecto a células sensibles hay un expresión incrementada de FL (p