Nanopartículas biogénicas producidas por una cepa de Streptomyces sp. metalo-resistente

DAVILA COSTA JOSE; PATERLINI PAULA; ROMERO CINTIA M; PEREYRA JULIAN; ALVAREZ ANALÌA

Bs As

Encuentro; XIX Encuentro de Superficies y Materiales Nanoestructurados-Nano; 2019

obtienen nanopartículas (NPs) por procesos biológicos tales como la reducción de una sal metálica por acción de biomoléculas provenientes de plantas, algas, bacterias, hongos y virus. Estas biomoléculas pueden actuar como agentes reductores y/o estabilizadores para la formación de las NPs. Diversos microorganismos empleados en la biorremediación de metales tóxicos han sido reconocidos recientemente como posibles nano fabricas ecológicas. Las AgNPs tienen una gran importancia debido a sus aplicaciones en medicina para el revelado de imágenes tumorales, liberación controlada de drogas, y fundamentalmente, excelentes propiedades antimicrobianas.El objetivo del presente trabajo fue evaluar la capacidad de biosíntesis de AgNPs por Streptomyces M7, realizar la caracterización físico-química de las mismas, identificar el contenido proteico involucrado en su síntesis y estabilidad; y determinar su efecto antimicrobiano.La actinobacteria metalo-resistente Streptomyces M7 fue cultivada durante 72 hs en caldo Tripteína-Soja. Las células (10 gL-1) separadas del sobrenadante por centrifugación, fueron inoculadas en agua tridestilada e incubadas con agitación 72 hs. Mediante centrifugación se recuperó el sobrenadante (fuente de biomoléculas reductoras) con el que se preparó una solución de AgNO3 de 0,5 y 1 mM. Las soluciones se incubaron con agitación, 72 hs y se tomaron muestras cada 24 hs, realizando controles apropiados. Se evaluó la síntesis de AgNPs por medición de absorbancia (espectrofotómetro UV-visible, 200-800 nm) y por microscopia electrónica de barrido (MEB). La composición elemental de las AgNPS se determinó mediante Espectroscopia de Energía Dispersada (EDS) y su estabilidad térmica se evaluó mediante Termogravimetría (TGA). Las NPs obtenidas se concentraron y fueron sembradas en geles de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes (SDS-PAGE). Las bandas de proteínas obtenidas fueron caracterizadas por Espectrometría de Masas utilizando MALDI-TOF-MS (matrix-assisted laser desorption/ionization connected to a time-of-flight ion detector and mass spectrometry).La muestra tomada a las 72 hs, con una concentración 1 mM AgNO3 presentó el pico más alto de absorbancia (DO: 1,48) en comparación a las demás muestras. Esta absorbancia coincide con la reportada para AgNPs. Las imágenes de MEB revelaron la presencia de NPs agregadas, de tamaño heterogéneo entre 17,71 nm (min) y 94,44 nm (max) en el caso de AgNPs. El espectro EDS presentó una fuerte señal para Ag y otros picos más débiles correspondientes a otros elementos.Además, se evaluó la capacidad antimicrobiana de las AgNPs frente a cándida.