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Producción de lipasas de Bacillus spp. y su inmovilización sobre soportes orgánicos e inorgánicos1,2Martorell, P.V.; 2Gómez, M.I. 2Navarro, M.C.; 1Baigorí; M.D.; 1Pera, L.M.; 1,2Romero, C.M.1Planta Piloto de Procesos Industriales y Microbiológicos (PROIMI-CONICET)2Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia, Universidad Nacional de Tucumán.El uso de la biocatálisis en procesos tecnológicos tiene numerosas ventajas, aunque también restricciones dadas principalmente por el elevado costo de producción de las mismas. Es por esto que su potencial reciclo o reutilización es esencial desde un enfoque económico. Desde esta perspectiva, la inmovilización de enzimas es una alternativa de gran potencial, ya que permite producir biocatalizadores más estables y que pueden ser usados en sucesivos lotes o en procesos continuos, lo cual es una cuestión clave para su aplicación industrial. Existen diversos soportes para la inmovilización de enzimas, entre los que se pueden considerar soportes orgánicos, como los biopolímeros presentes en lo biofilms bacterianos, o soportes inorgánicos como las partículas magnéticas. El objetivo de este trabajo fue producir e inmovilizar lipasas microbianas sobre distintos soportes a partir de lipasas libres o ligadas a biofilm.Se realizó el aislamiento e identificación de cepas de Bacillus productoras de lipasas y/o de biofilm a través del análisis de la secuencia del gen ADNr 16S. La actividad lipasa fue determinada en placas adicionadas con tributirina (1 %) o aceite de oliva (2 %). La producción de lipasas en medio líquido se desarrolló en medio nutritivo (LB) a 37 °C y 300 rpm, mientras que las cepas productoras de lipasas ligadas a biofilm se desarrollaron en iguales condiciones aunque sin agitación. La inmovilización de lipasa extracelular se realizó por adsorción sobre partículas magnéticas de óxidos mixtos, Mg2Fe2O4 (en una relación enzima:soporte 1ml:20mg), a 4 °C y con agitación durante 24 h. La inducción e inmovilización de biofilms con actividad lipasa se desarrolló sobre resinas aniónicas (Dowex OH), polímeros naturales (celofán) y materiales cerámicos, durante 5 días a 30 °C sin agitación.A partir de 52 aislamientos bacterianos se seleccionaron las cepas Mcn4 y Hmr1 productoras de lipasas extracelulares y lipasas ligadas a biofilm, respectivamente. Las mismas fueron taxonómicamente relacionadas al género Bacillus spp. La cepa Mcn4 mostró la mejor actividad extracelular (4,31 U/ml) y la cepa Hmr1 la mejor actividad lipasa ligada al biofilm (0,98 U/mg). La actividad lipasa extracelular inmovilizada al soporte Mg2Fe2O4, mantuvo un 66,7 % de su actividad inicial luego de 2 lavados con buffer fosfato. Por otro lado, la actividad lipasa ligada al biofillm incluyó como control cultivos desarrollados sin soporte. La misma se vio incrementada un 40 % con respecto al control en presencia de resina aniónica Dowex OH, un 27 % en presencia de material cerámico y un 14 % en presencia de celofán.El desarrollo de sistemas enzimáticos inmovilizados puede mejorar la perspectiva de la biocatálisis a escala industrial disminuyendo significativamente los costos de producción y mejorando el rendimiento de los productos obtenidos por biocatálisis.