Producción y caracterización preliminar del antimicrobiano producido por Lecanicillium sp. LY 72.14, una cepa fúngica aislada de la eco-región de Las Yungas tucumanas

DANILOVICH, MARIANA; FARIÑA, JULIA; DELGADO, OSVALDO

San Miguel de Tucumán

Congreso; REDBIO 2015; 2015

REDBIO ARGENTINA. ASOCIACIÓN CIVIL

En la actualidad, la resistencia bacteriana ocasiona elevados índices de mortalidad en hospitales, e importantes pérdidas económicas para las instituciones de la salud. A pesar de la diversidad de compuestos antimicrobianos disponibles, la resistencia bacteriana frente a antibióticos convencionales se incrementó drásticamente en los últimos años, convirtiéndose en una seria problemática que alerta el sistema de salud mundial. Frente a este fenómeno, numerosas investigaciones se han enfocado en la búsqueda de metabolitos con actividad antimicrobiana producidos por microorganismos aislados de microbiotas expuestas a determinadas situaciones ambientales condicionantes de mecanismos de defensa o competición. En trabajos previos se aislaron 242 hongos filamentosos de la eco-región de Las Yungas tucumanas, de los cuales, un 63% presentó actividad antimicrobiana. Como parte del screening, se seleccionó al aislamiento LY 72.14 por su potente actividad antimicrobiana contra diversos patógenos de interés clínico. El aislamiento fue identificado molecularmente mediante amplificación del ADNr 18S, ITS1, 5,8S, ITS2 y dominio D1/D2 del 28S. Se realizaron también observaciones macro- y micro-morfológicas en diferentes medios de cultivo. Se evaluó además la influencia de la composición del medio de cultivo, del pH y de la temperatura de incubación, sobre la producción del antimicrobiano en estudio. Se ensayó el espectro de inhibición contra patógenos de interés clínico, cuantificando el título de actividad antimicrobiana por el método de dilución crítica. Además se determinó la carga neta del antimicrobiano a pH 8,0 y se estimó su tamaño molecular relativo. Finalmente se determinó la sensibilidad del antimicrobiano producido frente al tratamiento térmico, a diferentes pHs y con enzimas proteolíticas. El antimicrobiano producido por el aislamiento LY 72.14 (identificado molecularmente como Lecanicillum sp.) mostró inhibición contra las bacterias testeadas, tanto Gram positivas como Gram negativas. Las condiciones óptimas para la producción del antimicrobiano fueron 25ºC y valores de pH entre 6-7. El antimicrobiano producido presentó una carga neta positiva a pH 8, con una talla molecular relativa entre 10 y 30 KDa, y un título de actividad antimicrobiana en condiciones optimizadas de 800 UA/mL. La actividad estudiada mostró estabilidad en un amplio rango de pH (2-12) y temperatura (-20 a 70ºC), siendo además estable al tratamiento con enzimas proteolíticas. Como conclusión se destaca que, ante el desafío constante que representa para la comunidad científica la búsqueda de antimicrobianos nuevos, más potentes o con un espectro de acción diferente, los estudios de micoprospección a partir de hongos filamentosos aislados de ecosistemas naturales podrían ser una herramienta muy valiosa para la exploración e identificación de nuevos compuestos bioactivos de interés biotecnológico.