PROIMI   05436
PLANTA PILOTO DE PROCESOS INDUSTRIALES MICROBIOLOGICOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Amycolatopsis cuprotucumanensis sp. nov., a novel copper resistant actinobacterium
Autor/es:
ALBARRACÍN, V.H.; AVILA, ANA N.; AMOROSO, MARÍA J.; TRUJILLO, MARTHA E.; ABATE, C. M.
Lugar:
New Castle, UK
Reunión:
Simposio; 14th International Symposium on the Biology of Actinomycetes; 2007
Institución organizadora:
Sociedad Internacional de Biología de Actinomycetes
Resumen:
La cepa actinobacterium AB0, aislada de sedimentos contaminados con cobre, ha demostrado ser resistente a altas concentraciones en medios mínimos., extracto de suelo y suelos contaminados con cobre. Esta capacidad de bioacumulación se demostró previamente a través del fraccionamiento subcelular y microscopía electrónica acoplada a tinción del metal. Sin embargo no hay una información específica sobre proteínas o sus respectivos genes involucrados en los mecanismos de resistencia a cobre en actinobacterias. En este trabajo se realizó una caracterización polifásica de este microorganismo. Además se construyeron oligonucleótidos específicos para genes que codifican proteínas involucradas en le transporte y acumulación de cobre por esta cepa. Se observaron características morfológicas y fisiológicas de la cepa AB0 sobre varios cultivos en medios sólidos. Un micelio vegetativo de color amarillo miel desarrolló en todos los medios ISP (Internacional Streptomyces Project) probados. Solo se formó micelio aéreo sobre ISP 5 y 7, mientras que se observaron pigmentos no solubles en todos los medios. Se investigó la utilización de carbohidratos sobre le medio ISP 9 usando la técnica en placa de microtitulación. La cepa AB0 fue capaz de crecer en presencia de glucosa, arabinosa, sacarosa, inositol, manosa, fructosa y rafinosa. Se probó la tolerancia a la lisozima y la NaCl. Se obtuvo el máximo crecimiento a 5 mgL-1 de NaCl y a 100 mg mL-1 de lisozima. Al utilizar un sistema API 20E y APIZYM se obtuvo un perfil de las diferentes actividades enzimáticas. Una reacción de PCR para amplificar el 16S rDNA se llevó a cabo obteniéndose secuencias representativas pertenecientes al género Amycolaptosis. Se construyó un dendogramay se observó que la cepa AB0 estaba relacionada en un 99,8% con A. euryterma DSMZ 44348t. Estudios de hibridación DNA-DNA se realizaron para determinar la relación genómica AB0 y A. euryterma DSM 44348t. Los resultados de estos experimentos junto con diferencias fenotípicas significantes tales como resistencia a cobre y actividades enzimáticas con al cepa tipo A. euryterma DSM 44348t mostraron que el aislamiento AB0 podría se clasificado como a nueva especie del género Amycolaptosis. El nombre propuesto is Amycolaptosis cuprotucumanensis sp. nov. (cupro for its copper resistance; tucumanensis because it was isolated from sediments from the province of Tucumán, Argentina) Utilizando primers Específicamente diseñados para los dominios conservados de ATPasa P-tipo, se amplificó y secuenció un fragmento de  ADN de 60 pb de Amycolaptosis cuprotucumanensis AB0. Análisis de BLAT mostraron un 71% de homología de la secuencia deducida con una ATP-asa putativa transportadora de cationes de Nocardia fanzinica y un 65% con una ATP-asa translocadora de cobre de Mycobacterium fluorescens. Este es el primer trabajo de tales genes en el género Amycolaptosis. La capacidad de bioacumulación  de cobre intracelular de esta cepa es de importancia biotecnológica ya que esto puede ser utilizado para la remoción y recuperación de cobre de desechos contaminados.