Capacidad para formar biofilms in vitro de cepas de Candida productorsa de Candidosis superficiales y profundas

CASTILLO, N.; VIZOSO PINTO, M. G.; COLOMBRES, M.S.; ÁLVAREZ, C.; VAN GELDEREN, A.

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología; 2014

Las candidosis son un conjunto de infecciones micóticas oportunistas y/o emergentes producidas por levaduras del género Candida. Se presentan con mayor frecuencia en el ambiente hospitalario, en pacientes con defectos endócrinos o inmunes, o por variadas causas iatrogénicas, entre otras Un importante factor de virulencia es su capacidad de adhesión a superficies y de filamentizar. Éstos y otros factores les permiten formar biofilms en materiales implantados, que constituye un factor de virulencia adicional de gran relevancia en el mecanismo de patogenicidad. Estas biopelículas actúan como una barrera protectora contra componentes de la respuesta inmune del húesped y evitan la penetración de los compuestos antifúngicos, dificultando el tratamiento y aumentando significativamente los índices de morbi-mortalidad. OBJETIVO: determinar si la capacidad para formar biofilms in vitro de Candida está limitada a cepas de algunas especies z si se relaciona con el origen de los aislamientos. MATERIALES Y METODOS: Se determinaron género y especie de 45 cepas activadas de levaduras aisladas de diferentes muestras clínicas (piel, uña, flujo vaginal, materia fecal, esputo, hemocultivo) mediante crecimiento en CHROMAGAR, formación de tubo germinativo, pseudomicelio y clamidoconidios, micromorfología, y pruebas de asimilación y fermentación de compuestos carbonados y nitrogenados. luego se evaluó la capacidad de las mismas para producir biofilm , mediante la siembra de suspensiones preparadas a partir de de cultivos de 18h en placas de cultivo de 96 pocillos (1x106 cel. por pocillo). Lueo de eliminar las células no adheridas, las placas se cultivaron con medio fresco durante 36 h a 37ºC. Luego de eliminar las células no adheridas, las placas se incubaron con medio fresco durante 36 h a 37ªC. Los biofilms fueron revelados por el método de tinción con Cristal violeta.(O Toole y Kolter. La D.O. de los eluatos se midió a 595 nm para cuantificar los biofilms. Valores de D.O. mayores al blanco se consideraron positivos. RESULTADOS: De las 45 cepas de Candidda estudiadas, 15 correspondieron a la especie C. albicans y 30 a C. no albicans. Sólo 19 de las 45 cepas fueron capaces de formar abundante biofilm ((DO>0,2), asociándose éstos con mayor frecuencia a cepas de la especie C. parapsilosis. Mientras que la mayor parte de las cepas de C. albicans formaron biofilms con valores de DO inferiores a o,2. La formaciñon de biofilm fue más abundante en muestras provenientes de lavados bronquialveolares, a pesar de corresponder a distintas especies. CONCLUSIONES: La formación de biofilm por diferentes especies de Candida no responde a un patrón de desarrollo, existiendo variaciones en la producción del mismo entre especies, e incluos entre cepas de la misma especie. En las condiciones dadas, la capacidad de formación de biofilm fue mayor en cepas de C. parapsilosis que en cepas de C. albicans.