PROIMI   05436
PLANTA PILOTO DE PROCESOS INDUSTRIALES MICROBIOLOGICOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis metagenómico de la microbiota intestinal de larvas de Spodoptera frugiperda
Autor/es:
CABRERA, N.A.; VIRLA, EDUARDO G.; MCCARTHY, C.B.
Lugar:
Resistencia
Reunión:
Jornada; XVI Jornadas Argentinas de Microbiología y II Jornadas de microbiología e infectologia del NEA – MINEA 2011; 2011
Institución organizadora:
AAM
Resumen:
Análisis metagenómico de la microbiota intestinal de larvas de Spodoptera frugiperda”. Cabrera, N.A., Virla, E.G. y McCarthy C.B. XVI Jornadas Argentinas de Microbiología y II Jornadas de microbiología e infectologia del NEA – MINEA 2011, 29 de septiembre al 1 de octubre de 2011, Resistencia, Chaco En Argentina hay muchas plagas que siguen produciendo pérdidas económicas significativas y para las que el control con insecticidas y variedades resistentes es sólo un paliativo. En particular, Spodoptera frugiperda (Sf) (Orden Lepidoptera, Familia Noctuidae) es una de las plagas que más daño causa en la producción Argentina de maíz. Actualmente, esta plaga se controla con plantas transgénicas e insecticidas, pero la aparición de resistencia ha hecho que la utilización de entomopatógenos como agentes de control sea una alternativa atractiva. En este sentido, la microbiota del tracto digestivo de los insectos deriva del ambiente circundante y puede influenciar su ciclo de vida.. Por ello, un inventario de la microbiota asociada a Sf ayudaría a comprender las variaciones anuales y regionales de esta plaga (Gonzalez-Ceron et al., 2003) y a desarrollar estrategias novedosas para su control (Dillon y Dillon, 2004). Sin embargo, las estimaciones actuales indican que más del 99% de los microorganismos presentes en muchos ambientes naturales no son cultivables y, por lo tanto, no están fácilmente disponibles para realizar estudios básicos o biotecnológicos (Amann et al., 1995). La metagenómica facilita el análisis cultivo-independiente de las comunidades microbianas (Handelsman, 2004), un enfoque que no requiere suposiciones previas sobre la composición de la comunidad blanco. Objetivo: Caracterizar la microflora asociada a intestinos de larvas de Sf para identificar potenciales bioinsecticidas. Metodología: Larvas de Sf criadas en bioterio provenientes de “El Manantial” (Departamento de Lules, Tucumán) de cuarto y quinto estadio, se sacrificaron por exposición a bajas temperaturas. Los intestinos se extrajeron mediante corte longitudinal y conservaron en PBS 1X a -20oC hasta su procesamiento. Se ensayó y optimizó un protocolo para la extracción de ADN genómico bacteriano. Posteriormente, se amplificaron secuencias 16S ADNr a partir del ADN extraído utilizando los cebadores 8F y 1492R (Crump et al., 1999; Stackebrandt y Liesack, 1993). Los productos de amplificación obtenidos fueron clonados y secuenciados. Resultados y Conclusiones: Se logró extraer ADN genómico bacteriano a partir de intestinos de larvas crecidas en bioterio. La pureza y concentración de este ADN fueron adecuadas para amplificar secuencias 16S ADNr. Los productos de amplificación fueron exitosamente clonados, construyéndose una biblioteca metagenómica bacteriana compuesta por 107 clones. Este trabajo representa el primer análisis metagenómico de la composición bacteriana de intestinos de larvas de Sf.