INVESTIGADORES
PIECKENSTAIN Fernando Luis
congresos y reuniones científicas
Título:
La oxidación de poliaminas en el apoplasto de plantas de tabaco facilita la infección por Sclerotinia sclerotiorum
Autor/es:
MARINA M, S MAIALE, E RIVAS, FL PIECKENSTAIN, OA RUIZ
Lugar:
Santa Rosa, La Pampa
Reunión:
Congreso; XXV Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal; 2004
Resumen:
Las poliaminas (PAs) son moléculas alifáticas cargadas positivamente a pH fisiológico, siendo ubicuas tanto en ecariotas como en procariotas ( Federico & Angelini, 1991). Las principales PAs son Putrecina (Put), Espermidina (Spd) y Espermina (Spm). Es conocida su importancia en el crecimiento y desarrollo de las plantas y recientemente se las ha relacionado en respuestas de defensa (Walters, 2003). La Spd y la Spm son oxidadas en sus aminos secundarios por amino-oxidasas dependientes de flavin adenina dinucleótido (FAD-AOs) ( Sebela et al, 2001), produciendo Diaminopropano (DAP), H2O2 y el correspondiente aminoaldehido (Cohen, 1998). En plantas de tabaco infectadas por TMV se demostró que la Spm aumenta en el apoplasto (Yamakawa et al, 1998).  Por otra parte, utilizando el mismo sistema se observó que la generación de  H2O2 se debe a la oxidación de PAs acumuladas en el apoplasto por la Poliamino-oxidasa (PAO) y que esto induce la muerte celular durante la Respuesta Hipersensible (HR) (Yoda et al, 2003).  Además, según Govrin y Levine, la HR facilita la infección de la planta por patógenos necrotróficos (Govrin and Levine, 2000). El objetivo de este trabajo es estudiar el rol de la Spm y la Spd durante la infección de plantas de Nicotiana.tabacum (Xanthi nc) con el hongo necrotrófico (S.sclerotiorum). En un primer experimento, se inocularon plantas de tabaco con micelio de S.sclerotiorum y se midieron PAs en apoplasto por dansil derivados por HPLC. De esta manera se detectó un aumento de Spd y Spm. Por otra parte, se determinó la presencia de actividad PAO utilizando sustratos marcados con 14C. En un segundo experimento, se infiltraron discos de hoja con soluciones de Spd, Spm y un inhibidor específico de la PAO (5 uM c/u) y luego se infectaron con micelio de S.sclerotiorum.  Se observó un mayor halo de infección en los discos infiltrados con PAs que en los controles (H2O) y en los infiltrados con el inhibidor, siendo en estos dos últimos iguales. Para sustentar ésto, se utilizó como sistema hojas enteras tomando por el pecíolo en las mismas soluciones, obteniendo los mismos resultados. En este último caso, se midió el contenido de PAs en extractos totales mediante dansil-derivados en HPLC y se observó un aumento de DAP en las hojas tratadas respecto de las controles. El inhibidor utilizado (un análogo de PAs) fue seleccionado de un pool de inhibidores a lo cuales se les había determinado previamente la Ki frente a PAO de Avena sativa. Además, se comprobó que dichos inhibidores no afectan el creciemiento de S. scleroiurum a concentraciones de 1000 veces la Ki.