INVESTIGADORES
PEIRU Salvador
congresos y reuniones científicas
Título:
Producción del antibiótico macrólido eritromicina C en Escherichia coli
Autor/es:
PEIRÚ, S; MENZELLA, H; RODRÍGUEZ, E; GRAMAJO, H
Lugar:
Mar del Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; I Congreso Argentino de Microbiología General; 2004
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Microbiología General
Resumen:
La producción de compuestos policetónicos, muchos de los cuales poseen una enorme relevancia clínica (eritromicina, tetraciclina, lovostatin, avermictina), se encuentra ampliamente distribuida entre bacterias de la familia actinomyces. La caracterización a nivel genético de las rutas biosintéticas de numerosos compuestos policétidos abrió la posibilidad de modificar genéticamente y recombinar las rutas biosintéticas de diferentes metabolitos, para dar lugar a la síntesis de librerías de nuevos compuestos policétidos. Para facilitar el desarrollo de estas librerías y debido a la gran dificultad de manipular genéticamente los organismos productores, se hizo necesario generar un hospedador que permita la expresión heteróloga de las policétido sintetasas (PKSs). De este modo, en un proyecto en colaboración con el grupo dirigido por el Dr. Khosla (Stanford-US), logramos por primera vez transferir la ruta de biosíntesis del aglicón precursor de la eritromicina, el 6-deoxieritronolido B (6dEB) de Saccharopolispora erythraea, a una cepa de E. coli modificada genética y metabólicamente. Sin embargo, la síntesis completa de eritromicina, al igual que la de muchos metabolitos derivados de compuestos policetónicos, involucra una serie de pasos biosintéticos post-PKS, normalmente ausentes en E. coli. En el caso de la eritromicina se requiere la síntesis y adición de los deoxiazúcares TDP-micarosa y TDP-desosamina al 6-dEB, y la actividad de dos enzimas hidroxilasas, para obtener finalmente el compuesto eritromicina C. Este proceso de “decoración” del policétido implica la expresión funcional de 17 genes heterólogos. A fin de lograr la síntesis completa del antibiótico eritromicina C en E. coli, decidimos construir dos operones, comprendiendo los genes de biosíntesis de ambos azúcares y las restantes enzimas accesorias.