INVESTIGADORES
PASSEGGI Mario Cesar Guillermo
congresos y reuniones científicas
Título:
Charla y Póster: Estudio de la morfología mitocondrial de plantas de Arabidopsis hcc1 y hcc2 mediante microscopia de fuerza atómica
Autor/es:
FRANCO, V.G.; MANSILLA, N.; CALAZA, F.; PASSEGGI (H), M.C.G.; WELCHEN, E.
Lugar:
Evento virtual, Córdoba (Córdoba), 16-30 Septiembre
Reunión:
Otro; RAFA2020, 105ª Reunión Nacional de la Asociación Física Argentina, Primera RAFA Webinar; 2020
Institución organizadora:
Asociación Física Argentina, Filial Córdoba (Córdoba)
Resumen:
La microscopía de fuerza atómica (AFM) es una herramienta poderosa utilizada para investigar la estructura de diferentes materiales. La superfiie de la muestra, es examinada mediante un escaneo mecánico; más específicamente, recopila datos para imágenes sondeándola en lugar de "mirándola". AFM ofrece una serie de características únicas, la más ventajosa es la gran potencia de aumento con alta resolución y la preparación mínima que requiere la muestra (las mismas pueden mantener su estado nativo o casi nativo). La adsorción de la muestra sobre un sustrato apropiado es un aspecto crucial a tener en cuenta para evitar destruir las estructuras nativas o alterar las interacciones macromoleculares presentes en la misma. Es por ello que aplicamos AFM al estudio de muestras biológicas ricas en mitocondrias vegetales. Las mitocondrias son organelas responsables de la respiración celular; miden entre 100-500 nm de ancho y 1000-7000 nm de largo. Las proteínas de síntesis de citocromo c oxidasa (SCO) participan en la inserción de cobre durante el ensamblaje de la citocromo c oxidasa (COX), complejo enzimático final de la cadena de transporte de electrones. En plantas de Arabidopsis thaliana, encontramos dos proteínas SCO, homólogas de la chaperona de cobre 1 y 2 (HCC1 y HCC2). Con el fin de aportar mayor entendimiento en relación al mecanismo de unión de cobre al complejo enzimático, estudiamos mitocondrias obtenidas de plantas de Arabidopsis salvajes (WT) y mutantes hcc1 o hcc2 con expresión reducida de HCC1 o HCC2 expuestas a estrés salino. El análisis de los resultados obtenidos de las plantas hcc1 o hcc2, permitió postular que HCC1 es un factor limitante para el ensamblaje de COX durante condiciones de alta salinidad y que HCC2 probablemente actúa como un modulador negativo de la actividad de HCC1 a través de interacciones proteína-proteína. Además, se propuso un papel directo e indirecto de HCC1 y HCC2 en la respuesta de expresión génica al estrés, respectivamente. Un complemento indispensable al estudio del rol biológico de estas proteínas se obtiene del análisis del impacto de estas mutaciones a nivel de la biogénesis y la estructura mitocondrial. El análisis morfológico de las mitocondrias mediante imágenes de AFM usando WS×M, demostró diferencias significativas entre las plantas hcc1 y hcc2, con las WT. Las mitocondrias de plantas hcc1 y hcc2 son de menor tamaño y tienen una menor altura de crestas. Estas diferencias pueden explicarse con las evidencias a nivel transcriptómico y fenotípico, dado que es en la membrana de las crestas donde se llevan a cabo los procesos metabólicos. Estos resultados, proveen respuestas a nivel estructural a preguntas biológicas respecto de la función de nuevas proteínas en sistemas vivos.Expuso: FRANCO, V.G.