Neuropéptidos en el cerebro de Rhodnius prolixus

SHEILA ONS

Buenos Aires

Simposio; XI Simposio internacional sobre el control epidemiológico de enfermedades transmititdas por vectores.; 2008

Fundación Mundo Sano

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} p.MsoBodyTextIndent, li.MsoBodyTextIndent, div.MsoBodyTextIndent {margin-top:0cm; margin-right:0cm; margin-bottom:6.0pt; margin-left:14.15pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Introducción: La interrupción de la fisiología normal de insectos vectores a través de manipular péptidos regulatorios es una dirección atractiva hacia una nueva generación de insecticidas. Para esto es necesario conocer y caracterizar los neuropéptidos presentes en estos insectos. Aquí llevamos adelante un análisis “peptidómico” en cerebros de Rhodnius prolixus, en lo que constituye el primer análisis de este tipo realizado en un insecto vector hasta la fecha. Nuestro trabajo abre nuevas perspectivas para el estudio de la fisiología de vectores.  Materiales y Métodos: a) Preparación de la muestra: Se realizaron disecciones y extracciones metanólicas de cerebros de R. prolixus adultos de ambos sexos.             b) nano-HPLC: Los extractos  metanólicos fueron separados en un sistema de nano-HPLC con columna C18 y un gradiente lineal de 0 a 80% de Acetonitrilo en 180 minutos.             c) Espectrometría de masas: Todas las fracciones cromatográficas fueron sometidas a un análisis por espectrometría de masas en tandem con un equipo MALDI TOF-TOF (ABI Analyzer 4800).             d) Identificación de péptidos: Los espectros de fragmentación fueron analizados manualmente con la ayuda del softweare Peaks Studio para la secuenciación de novo de los péptidos presentes.  Resultados: A través de técnicas de cromatografía, espectrometría de masas y secuenciación de novo hemos podido identificar 42 nuevos neuropéptidos en R. prolixus. Destacamos la presencia de nuevas miosupresinas, taquininas, sulfaquininas, orcoquininas, neuropéptidos F, piroquinina, corazonina, SIF-amidas, FMRF-amidas, hormona diurética, alatotropinas y alatostatinas.  Conclusiones: A pesar de su versatilidad y potencialidad, las técnicas de proteómica no habían sido aplicadas hasta la fecha para el estudio de neuropéptidos en insectos de interés sanitario. Aquí presentamos el primer análisis del complemento  neuropeptídico en un insecto vector. Hemos podido identificar y secuenciar numerosos péptidos en cerebro de R. prolixus, aportando las bases para futuros estudios farmacológicos útiles en el diseño de nuevos insecticidas.