FORMACIÓN DE BIOFILM DE MICROORGANISMOS MARINOS DEGRADADORES DE HIDROCARBUROS: INFLUENCIA DEL SUSTRATO DE CRECIMIENTO

MARCELA SEPÚLVEDA; REVUELTA F.; NELDA LILA OLIVERA; MARINA NIEVAS

Buenos Aires

Congreso; CAMAYA 2015; 2015

Asociación Argentina de Microbiología

Los microorganismos (MO) degradadores de hidrocarburos son ubicuos y responsables de los procesos de biodegradación de estos compuestos en una gran diversidad de ambientes. La utilización de MO de ocurrencia natural en actividades de recuperación de sitios contaminados con hidrocarburos(biorremediación) es una tecnología eficiente de tratamiento de residuos y efluentes, y de remediación ambiental. En particular, los sistemas con MO inmovilizados en biofilms poseen altas eficiencias y mayor supervivencia en condiciones adversas. El objetivo de este trabajo fue estudiar la capacidad deformación de biofilm de MO degradadores de hidrocarburos de origen marino en función del sustrato de crecimiento, para evaluar el potencial de los mismos para ser utilizados en biorremediación de hidrocarburos en sistemas inmovilizados. Para ello, se estudió el crecimiento de una cepa de Pseudomonas stutzeri (RS02) y dos consorcios microbianos (EC2-GO y FORS) en placas de 96 celdas con tubos cerrados de vidrio de 2 ml con 400 ul de medio mínimo marino y una única fuente de carbono. Se ensayaron como sustratos de crecimiento: glucosa, n-hexadecano, petróleo crudo, naftaleno, fenantreno, fluoreno y pireno. Se incubaron durante 20 días con agitación, y a tiempo final se determinó la turbidez del medio líquido (620 nm) y la formación de biofilm mediante la técnica de cristal violeta (595 nm). Se clasificó la formación de biofilm en función del valor de corte del control como débil, moderada o fuerte. Los MO ensayados resultaron fuertes formadores de biofilm cuando crecieron en glucosa. El consorcio microbiano EC2-GO enriquecido en gas-oil altamente intemperizado, fue capaz de formar biofilm débil o moderado sobre hidrocarburos aromáticos; yFORS presentó formación débil de biofilm sobre fenantreno, pireno y fluoreno. No se encontraron resultados positivos sobre n-hexadecano y petróleo para ambos consorcios. P. stutzeri (RS02) formó biofilm sobre todos los hidrocarburos estudiados, siendo fuerte sobre n-hexadecano, moderado sobre petróleo, naftaleno y fluoreno, y débil sobre fenantreno y pireno. En este trabajo no se encontró una correlación entre los valores positivos de aumento de la turbidez del medio líquido de los cultivos respecto a los resultados positivos de la formación de biofilm, en contraste con lo que se describe generalmente para MO que se estudian en medios ricos. Se demostró que la fuente de carbono afectafuertemente la formación de biofilm, y que la utilización de glucosa como fuente de carbono para realizar screening para la prospección de MO formadores de biofilm, previamente aislados sobre hidrocarburos, es recomendable aunque no concluyente. Los resultados obtenidos mostraron que los MO estudiados fueron capaces de metabolizar los hidrocarburos testeados e incluso formar biofilmsobre ellos, revelando buenas características de los mismos para su utilización en la degradación de compuestos aromáticos de mayor resistencia en sistemas inmovilizados.