INVESTIGADORES
DE MIGUEL natalia
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización del heterocomplejo Hsp90 en Toxoplasma gondii
Autor/es:
FIGUERAS LÓPEZ, MJ; ECHEVERRIA, P; DE MIGUEL N Y ANGEL, SO
Lugar:
Cordoba, Argentina
Reunión:
Congreso; XXI Reunión Cientifica Anual. Sociedad Argentina de Protozoología; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
La toxoplasmosis es una infeccion causada por Toxoplasma gondii, un parásito que puede diferenciarse en dos estadíos: el taquizoito, de replicación rápida y causante de la sintomatología y el bradizoito que forma quistes latentes, responsables de la infección crónica. La interconversión es fundamental en el establecimiento de la enfermedad crónica y es responsable de la reactivación de la enfermedad. Por lo tanto comprender los mecanismos que regulan la diferenciación en el parásito, resulta crítico. La importancia del heterocomplejo-Hsp90 (Hsp90, Hsp70 y las co-chaperonas Hip, Hop, Hsp40 y P23) se había evidenciado al tratar los parásitos con geldanamicina, observándose que ésta droga bloquea la interconversión en ambos sentidos. En el laboratorio se había demostrado también que la proteína Hsp90 está en citoplasma en taquizoito, y en citoplasma y núcleo en bradizoito. Para definir al heterocomplejo-Hsp90 de T. gondii se realizó un rastreo en el banco de datos (www.toxodb.org). Se pudieron identificar todas las proteínas que estarían formando parte de este. Hip, Hsp40, Hop y P23, fueron clonadas, secuenciadas, expresadas como proteínas recombinantes y producido anticuerpos. Basados en análisis in silico, Western blot y ensayos de co-IP (solo se analizó Hip y P23) se confirmó la identificación de las mismas y se pudo observar la formación de 2 complejos: al menos Hip-Hsp70-Hsp90 (heterocomplejo-Hsp90 temprano) y al menos Hsp90-P23 (maduro). Hop y P23 están presentes en citoplasma de taquizoitos y citoplasma y núcleo (en el caso de Hop una marcación leve) de bradizoitos, acompañando a Hsp90. Esto indicaría al existencia de un heterocomplejo-Hsp90 funcional ligado al desarrollo de T. gondii.