Localizacion subcelular diferencial de la familia de proteínas de choque térmico (sHsps) de Toxoplasma gondii

DE MIGUEL N, ECHEVERRIA PC, ANGEL SO

Mendoza, Argentina

Congreso; XX Reunión Cientifica Anual. Sociedad Argentina de Protozoología; 2005

Sociedad Argentina de Protozoología

Los resultados de este estudio describen por primera vez la identificación y caracterización de la familia alfa-cristalina/sHsps de Toxoplasma gondii. A partir de la búsqueda en la base de datos (www.toxodb.org) se identificaron 5 sHsps: Hsp20, Hsp21, Hsp28, Hsp29 y la previamente descripta Hsp30/Bag1. La secuencia aminoacidica de estas proteínas mostro una región altamente conservada, el dominio alfa-cristalino. Sin embargo, las regional N-terminal contienen características únicas en tamaño y secuencia. Mediante una análisis por RT-PCR se pudo observar que la mayoría de las sHsps de T. gondii están expresadas constitutivamente en los estadios de taquizoito y bradizoito, con la excepción de Hsp30/Bag1 y Hsp28. Ensayos de cromatografía de exclusión molecular demostraron que las proteínas recombinantes (rHsp20, rHsp21, rHsp28 y rHsp29) eluyen como dos picos, uno de ellos correspondiente al peso molecular del monómero y otro a la estructura oligomérica. Interesantemente, las shsps de T. gondii están localizadas en diferentes compartimentos subcelulares. Hsp20 se ubica en la zona apical del parasito, Hsp21 posee localización citoplasmática, Hsp28 es mitocondrial y Hsp29 se encuentra asociada a membrana. Estas diferencias observadas en sus regiones N-terminal y en la localización subcecular podrían sugerir una función diferente para cada una de las sHsps de T. gondii