INVESTIGADORES
MERONI silvina Beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
CARACTERIZACION DEL SISTEMA LKB1/AMPK EN EL TESTICULO
Autor/es:
AGNELLO ANA CAROLINA; GALARDO MARÍA NOEL LUJÁN; RIERA MARÍA FERNANDA; PELLIZZARI ELIANA HERMINIA; CIGORRAGA SELVA BEATRIZ; MERONI SILVINA BEATRIZ
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LIII Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La kinasa activada por AMP (AMPK) es una enzima clave en el control de la homeostasis energética celular. Es un heterotrímero compuesto por una subunidad catalítica alfa y dos subunidades regulatorias beta y gama. Esta kinasa es activada por un aumento en la relación AMP/ATP que conduce a la fosforilación de la subunidad alfa por kinasas upstream siendo la mas estudiada la LKB1. Previamente habíamos demostrado la participación de AMPK en los mecanismos involucrados en la producción de lactato en la célula de Sertoli (CS). El objetivo de este trabajo es analizar la expresión de las isoformas de la subunidad catalítica alfa de AMPK y de su kinasa LKB1 en los distintos tipos celulares que conforman el testículo. Se aislaron CS,  células de Leydig (CL) y células germinales (CG) a partir de ratas de 20, 60 y 27 días de edad respectivamente. Asimismo se obtuvieron homogenatos de músculo y de testículo de animales de 20, 30 y 60 días de edad. La expresión de las subunidades a1 y a2 de AMPK y la de LKB1 se analizó por Western Blot. Ambas subunidades se expresan en CL, CS y CG. La a1 se expresa más en testículo que en músculo mientras que lo contrario ocurre con a2. Se observó que la expresión de LKB1 aumenta con la maduración sexual en testículo pero que tiene muy baja expresión en CS lo que sugiere localización en CG. Este resultado sugirió la activación de AMPK en CS por otra kinasa upstream como la kinasa de calmodulina kinasa (CAMKK). Para evaluar esta posibilidad analizamos el efecto de 4BrA23187, un ionóforo de Ca, sobre los niveles de AMPK fosforilada,. Observamos que el ionóforo aumenta en forma tiempo dependiente la activación de la kinasa: 5min: 1.1± 0.1; 15min: 2±0.3; 30min: 1.6±0.1 (veces de estímulo vs basal, *p<0.05). En su conjunto los resultados sugieren una expresión diferencial de subunidades alfa de AMPK y de LKB1 en los distintos tipos celulares del testículo. La ausencia de expresión de LKB1 en CS y el aumento de AMPK-P en respuesta al ionóforo sugieren una activación de AMPK en CS mediada por CAMKK.