INVESTIGADORES
MERONI silvina Beatriz
congresos y reuniones científicas
Título:
Mecanismos moleculares involucrados en la regulación funcional de las células germinales masculinas por Lactato
Autor/es:
GALARDO MARÍA NOEL LUJÁN; RIERA MARÍA FERNANDA; REGUEIRA MARIANA; PELLIZZARI ELIANA HERMINIA; CIGORRAGA SELVA BEATRIZ; MERONI SILVINA BEATRIZ
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Científica Anual de Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La espermatogénesis ocurre en un microambiente particular constituido por productos de secreción de las células de Sertoli. Dentro de los mencionados productos se destaca el lactato (L), principal sustrato energético de las células germinales (CG). Hemos observado que L incrementa la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) las que conducen a la activación de señales de transducción tales como PKB y p38-MAPK en CG. Actualmente las ROS son consideradas moléculas señal cuya fuente de producción varía según el estímulo y el tipo celular en estudio. Hasta el momento se desconoce que mecanismos utiliza L para incrementar la producción de ROS en CG. Asimismo no se analizaron los mecanismos moleculares utilizados por las ROS para activar las señales de transducción mencionadas. El objetivo de este trabajo fue analizar los mecanismos utilizados por L para incrementar la producción de ROS y los mecanismos moleculares utilizados por dichas ROS para activar PKB y p38-MAPK. Se utilizaron CG (espermatocitos y espermátides) aisladas de testículos de rata de 31 días de edad. Las mismas fueron cultivadas por diferentes períodos de tiempo en ausencia o presencia de L 20mM y de los siguientes compuestos: rotenona (R) 1mM –inhibidor del Complejo I NADH deshidrogenasa-, alopurinol (Al) 100mM –inhibidor de xantino oxidasa-, apocinina (Ap) 100mM –inhibidor de las NAD(P)H oxidasas-, oxamato (O) 20mM –inhibidor de LDH-, wortmanina (W) 0.1mM –inhibidor de PI3K- y PP2 20mM –inhibidor de Src-. Se analizó por el ensayo de TBAR la presencia de malondialdehído (MDA) y por western blot se determinaron los niveles de PKB- y p38-MAPK- fosforiladas (P). Se obtuvieron los siguientes resultados: 1) TBAR: B: 0.85±0.09, L30’: 1.26±0.08*, L+R: 1.31±0.10*, L+Al: 1.20±0.09*, L+Ap: 0.93±0.08, L+O: 0.82±0.09pmoles MDA/mg proteína, X±DS, n=3, *P<0.05 vs B; 2) western blot PKB-P: B: 1, L60’: 2.2±0.3, L+W: 0.2±0.1; 3) western blot p38-MAPK-P: B:1, L30’: 1.8±0.2, L+PP2: 0.4±0.1 veces de estímulo respecto al basal, X±DS, n=3. Los resultados sugieren que L debe ser oxidado por acción de la enzima LDH para incrementar la producción de ROS por la NAD(P)H oxidasa y que dichos ROS activan PKB y p38-MAPK a través de PI3K y Src respectivamente.