INVESTIGADORES
BRECCIA Javier Dario
congresos y reuniones científicas
Título:
6-O-α-Ramnosil-β-glucosidasa II de Acremonium sp. DSM 24697
Autor/es:
WEIZ G; MAZZAFERRO LS; KOTIK M; KREN V; BRECCIA JD
Reunión:
Simposio; III SILABYB (Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones); 2018
Resumen:
Las diglicosidasas son enzimas que catalizan la hidrólisis del enlace heterosídico y liberan el disacárido y su correspondiente aglicona en una única reacción. El hongo Acremonium sp. DSM 24697 produce dos diglicosidasas denominadas 6-O-α-ramnosil-β-glucosidasa I y 6-O-α-ramnosil-β-glucosidasa II. La primera ha sido caracterizada previamente y es específica para flavonoides 7-O-rutinosilados [1].6-O-α-ramnosil-β-glucosidasa II posee un peso molecular aparente de 85 kDa, un pH y una temperatura óptima 5.0 y 50 °C respectivamente. Este catalizador mostró una alta promiscuidad de sustratos respecto de las diglicosidasas descriptas en literatura. Fue capaz de hidrolizar 3-O-rutinósidos, 7-O-rutinósidos y con menor especificidad también hidrolizó 7-O-neohesperidósidos y los polisacáridos xilano y laminarina. El gen que codifica esta proteína se identificó en la secuencia del genoma de Acremonium sp. DSM 24697 y se expresó funcionalmente en Pichia pastoris. La proteína se clasificó dentro de las glicósido hidrolasas de la familia 3 (GH3) a diferencia de las diglicosidasas fúngicas conocidas, que pertenecen a las familias GH1 y GH5 [2]. Dentro de esta familia, αRβG II es el primer catalizador que actúa en modo endo y, de acuerdo al mecanismo de reacción retaining de la familia GH3, es capaz de transglicosilar. De esta forma, se sintetizaron rutinósidos de alcoholes primarios, secundarios y fenólicos. Referencias1. Mazzaferro, L.; Piñuel, L.; Minig, M.; Breccia, J.D. Arch Microbiol. 2010. 192, 383?393 2. Ishikawa M, Kawasaki M, Shiono Y, Koseki T. Appl Microbiol Biotechnol. 2018. 102: 3193-3201.AgradecimientosEste trabajo fue financiado por el Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Universidad Nacional de La Pampa (UNLPam) y la Agencia Nacional de Promoción Científica y Técnica (ANPCyT) de Argentina.