INVESTIGADORES
MAZZAFERRO Laura
congresos y reuniones científicas
Título:
6-O-α-Ramnosil-β-glucosidasa II de Acremonium sp. DSM 24697
Autor/es:
GISELA WEIZ; LAURA S. MAZZAFERRO; MICHAEL KOTIK; VLADIMIR KREN; JAVIER D. BRECCIA
Reunión:
Simposio; III Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2018
Resumen:
Las diglicosidasas son enzimas que catalizan la hidrólisis del enlace heterosídico y liberan el disacárido y su correspondiente aglicona en una única reacción. El hongo Acremonium sp. DSM 24697 produce dos diglicosidasas denominadas 6-O-α-ramnosil-β-glucosidasa I y 6-O-α- ramnosil-β-glucosidasa II. La primera ha sido caracterizada previamente y es específica para flavonoides 7-O-rutinosilados1.6-O-α-ramnosil-β-glucosidasa II posee un peso molecular aparente de 85 kDa, un pH y una temperatura óptima 5.0 y 50 °C respectivamente. Este catalizador mostró una alta promiscuidad de sustratos respecto de las diglicosidasas descriptas en literatura. Fue capaz de hidrolizar 3-O-rutinósidos, 7-O-rutinósidos y con menor especificidad también hidrolizó 7-O- neohesperidósidos y los polisacáridos xilano y laminarina. El gen que codifica esta proteína se identificó en la secuencia del genoma de Acremonium sp. DSM 24697 y se expresó funcionalmente en Pichia pastoris. La proteína se clasificó dentro de las glicósido hidrolasas de la familia 3 (GH3) a diferencia de las diglicosidasas fúngicas conocidas, que pertenecen a las familias GH1 y GH52. Dentro de esta familia, αRβG II es el primer catalizador que actúa en modo endo y, de acuerdo al mecanismo de reacción retaining de la familia GH3, es capaz de transglicosilar. De esta forma, se sintetizaron rutinósidos de alcoholes primarios, secundarios y fenólicos.
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