INVESTIGADORES
MUGLIA Cecilia Isabel
congresos y reuniones científicas
Título:
El Herpesvirus equino 1 interfiere con la apoptosis en células infectadas.
Autor/es:
SCROCHI, M.; BRAVI, M.E.; FUENTEALBA, N.; GIMENO, E.; PORTIANSKY, E.; BARBEITO, C.|; ZANUZZI, C.; MUGLIA C.I.; GALOSI, C.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XI Congreso Argentino de Virología, II Congreso Latinoamericano de Virología, IV Simposio de Virología Clínica, II Simposio de Virología Veterinaria; 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Virología
Resumen:
El Herpesvirus equino 1 (EHV-1) produce signos respiratorios, nerviosos, abortoy síndrome neonatal en equinos, causando importantes pérdidas económicas. Enlas células la muerte por apoptosis actúa como un mecanismo de proteccióncelular frente a la infección debido a que es un proceso programado con lafinalidad de eliminar aquellas células potencialmente peligrosas para elorganismo. En otros alphaherpesvirus, se han identificado acciones implicadascon la modulación de la apoptosis, sin embargo ésto no fue aún estudiado en elEHV-1. El objetivo de este trabajo fue evaluar en cultivos de células equinas,el efecto modulatorio sobre la apoptosis, del EHV-1 durante su ciclo dereplicación. Se utilizaron células de cultivo primario de riñón equino crecidascon Medio Mínimo Esencial suplementadocon glutamina, antibióticos y 10% de suero fetal bovino, infectadas con la cepa AR8 (MOI=10) yrecolectadas a las 3, 9, y 18 hs posinfección (pi).Simultáneamente se realizaron controles de inducción a la apoptosis (incubación con sorbitol 1Mdurante 1 h a 37 °C) y controlesnegativos (sin tratamiento). Laevaluación se realizó mediante tinción con bromuro de etidio y naranja deacridina (BE/NA) para la observación de compactación y fragmentación nuclear; Anexina V/ioduro depropidio por citometría de flujo para la detección de la exteriorización defosfatidilserina; medición de actividad de caspasa 3 mediante incubación de loslisados celulares con el sustratofluoregénico específico y determinación de cambios ultraestructuralespor microscopía electrónica de transmisión (MET). El análisispor BE/NA determinó que a lo largo de todo el ciclo de replicación viral, elíndice de apoptosis fue significativamente menor en los grupos infectadosrespecto al control positivo de la misma. El análisis de laexteriorización de fosfatidilserina reveló que a las 3 y 9 hs pi el porcentajede marcación en los grupos infectados fuesignificativamente menor respecto al grupo 18 hs pi y al control positivo deapoptosis. La evaluación de la actividad de caspasa 3 reveló, en la totalidadde los grupos infectados, valores significativamente menores respecto delcontrol positivo de apoptosis. Por MET se confirmó la presencia de partículasvirales y cambios ultraestructurales característicos del proceso apoptótico. Resultadossimilares fueron encontrados con experiencias en células heterólogas (MDBK). Seconcluye que la infección por EHV-1 interfierecon la muerte por apoptosis en las células infectadas durante su ciclo dereplicación viral, estrategia utilizada por el virus para asegurar su ciclo devida.