EVALUACIÓN DE LA INTERFERENCIA EN LA MUERTE POR APOPTOSIS EN CÉLULAS DE CULTIVO INFECTADAS CON HERPESVIRUS EQUINO 1.

SCROCHI, M.; ZANUZZI, C.; FUENTEALBA, N.; BRAVI, M.E.; GIMENO, E.; PORTIANSKY, E.; MUGLIA, C. I.; GALOSI, C.

Chascomús

Jornada; XV Jornadas de la Sociedad Argentina de Biología; 2013

Sociedad Argentina de Biología

La muerte por apoptosis puede actuar como un mecanismo de protección contra agentes infecciosos. El Herpesvirus equino tipo 1 (EHV-1) es un agente infeccioso que produce signos respiratorios, nerviosos, muerte embrionaria, aborto y síndrome neonatal en equinos. A diferencia de otros alphaherpesvirus que modulan la apoptosis para favorecer su replicación dentro de la célula infectada, se desconoce si el EHV-1 podría ejercer dicha acción, solo se demostró un efecto inhibidor sobre neuronas infectadas in vitro. Nuestro objetivo, fue estudiar el efecto del EHV-1 en cultivos celulares no neurales. Se utilizaron células Madin-Darby bovine kidney infectadas con EHV-1 e inducidas a la apoptosis a 3, 9, y 18 hs posinfección (pi) mediante su incubación con sorbitol 1M, (Inf+/ Apo+). Para cada tiempo analizado se realizaron controles positivos y negativos de apoptosis e infección. Se evaluó cuantitativamente la apoptosis mediante tinción con bromuro de etidio y naranja de acridina, se detectó por citometría de flujo la exteriorización de fosfatidilserina mediante Anexina V /ioduro de propidio y reconocieron cambios ultraestructurales por microscopía electrónica de transmisión (MET). El análisis de las técnicas determinó que solo a las 9 hs pi el índice de apoptosis fue significativamente menor en el grupo (Inf+/ Apo+) respecto al control positivo de la misma (Inf-/Apo+). Por MET se confirmó la presencia del virus y cambios ultraestructurales característicos del proceso apoptótico. Se concluye que la infección por EHV-1 retardaría la apoptosis en células infectadas durante la primera etapa del ciclo de replicación viral, efecto que podría favorecer su multiplicación.