INVESTIGADORES
MUGLIA Cecilia Isabel
congresos y reuniones científicas
Título:
Impacto de galectina-1 sobre la apoptosis de enterocitos.
Autor/es:
MUGLIA, C. I; MERCER, N.; TOSCANO, M.; POZNER, R.; SCHATTNER, M.; RABINOVICH, G.; DOCENA, G.
Lugar:
La Falda. Córdoba
Reunión:
Congreso; LXI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argetina de Inmunología
Resumen:
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La galectina 1 (Gal-1) es una proteína que reconoce terminales b-galactósidos localizados en la superficie de distintos tipos celulares, regulando de este modo numerosos procesos biológicos. En función de la función central de Gal-1 en el mantenimiento de la tolerancia inmunológica y su localización incrementada a nivel del epitelio intestinal nos propusimos estudiar el efecto de Gal-1 en la apoptosis de entericitos de ratones de la cepa C57BL/6. Se estudió el fenotipo intestinal mediante técnicas histológicas clásicas, muerte celular y expresión de receptores específicos por microscopía de fluorescencia (Bromuro de etidio/Naranja de acridina y Gal-1 biotinilada) y apoptosis por citometría de flujo (Anexina V, ioduro de propidio, TUNEL, caspasa-3 y JC-1).Se observó una mayor longitud vellositaria en ratones Lgals1-/- (0,26 mm ± 0,02 vs. 0,31 mm ± 0,01, p<0,002) con respecto a los ratones WT, Mientras que ratones Lgals1-/- no muestran una mayor tasa de proliferación (PCNA) con respecto a los WT. Además se observó que la punta de la vellosidad expresa mayor cantidad de receptores glicosilados con capacidad de ser reconocidos por Gal-1. A partir de enterocitos aislados de intestino delgado se estudió el efecto de Gal-1 recombinante a distintas concentraciones (0-560 mg/ml) observándose un incremento dosis-dependiente de la apoptosis (Anexina V/IP). Por TUNEL se obtuvo el mismo resultado con una fragmentación del DNA 3 veces mayor al basal, en presencia de Gal-1 (280 mg/ml). Para estudiar el mecanismo de apoptosis se utilizó un inhibidor de caspasas (Z-VAD-FMK) observándose un efecto inhibitorio por citometría de flujo (% de células apoptóticas: 23,5 ± 1,5 vs 11,5 ± 3,5, p<0,01 para células tratadas con Gal-1, con gal-1+Z-VAD-FMK, respectivamente; control negativo: 6,2 ± 3). Sin embargo, al analizar los niveles de caspasa-3 activa, no se hallaron diferencias estadísticamente significativas. Al estudiar la integridad de membrana mitocondrial con JC1, se encontró que las células tratadas con gal-1 presentaron un marcado aumento de la permeabilidad mitocondrial (% de células alteradas: 37 ± 3 vs 21,5 ± 0,5, p< 0,03 para células tratadas y sin tratar con Gal-1, respectivamente). Estos resultados indican que Gal-1 se comporta como un inductor de apoptosis en enterocitos murinos, a través de la activación de la vía apoptótica mitocondrial. Este efecto podría ser relevante tanto para la homeostasis intestinal como en situaciones patológicas inflamatorias donde se observa una atrofia vellositaria.