INVESTIGADORES
MUGLIA Cecilia Isabel
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis de un mutante de R. tropici afectado en la glutatión sintetasa: rol del glutatión en la tolerancia a distintos estreses ambientales
Autor/es:
RICCILLO, P. M.; MUGLIA, C. I.; AGUILAR, O. M.
Lugar:
Mendoza, Argentina
Reunión:
Congreso; XXXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular; 1998
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular
Resumen:
A partir de una colección de mutantes inducidos de R. tropici defectiva en las tolerancias intrínsecas a la temperatura y acidez, se aisló la cepa 13T2, cuyo crecimiento es sensible a la acidez. La región de ADN de 13T2 conteniendo la secuencia del transposón fue clonada como un fragmento EcoRI. La secuenciación de la región de ADN de rizobio flanqueante a la única inserción del transposón Tn5 permitió identificar un ORF con un alto grado de homología con el gen gshB de Escherichia coli. Este gen codifica para la enzima glutatión sintetasa.
Este mutante, además de estar afectado en la tolerancia a la acidez presenta una mayor sensibilidad a otros estreses tales como el osmótico y oxidativo. Se ha demostrado el rol del glutatión en la detoxificación de metilglioxal en E. coli. Hemos encontrado que el mutante 13T2 ha perdido la resistencia al agente electrofílico metilglioxal, indicando que un mecanismo similar el cual procede a través de formación de aductos de glutatión, también funcionaría en R. tropici. Al suplementar el medio mínimo con glutatión se restauró el fenotipo salvaje de tolerancia a los distintos estreses.
La nodulación del mutante 13T2 es similar a la de la cepa salvaje en condiciones de temperatura normal y neutralidad. El nivel de la expresión de genes de nodulación medida con una fusión nodA-lacZ cuando se lo induce con el flavonoide específico narigenina es significativamente menor que la encontrada en la cepa salvaje. Estos resultados demuestran el requerimiento de glutatión endógeno para un conjunto de adversidades ambientales.