INVESTIGADORES
MUGLIA Cecilia Isabel
congresos y reuniones científicas
Título:
OPTIMIZACIÓN DE MÉTODOS PARA IDENTIFICAR Y CARACTERIZAR LB IGE+ EN PÓLIPOS JUVENILES DE PACIENTES PEDIÁTRICOS SENSIBILIZADOS A ALÉRGENOS ALIMENTARIOS
Autor/es:
ILID, M; DOCENA, G.; MUGLIA C.I.
Lugar:
La Plata
Reunión:
Jornada; Avances en Inmunología Traslacional FOCIS Goes South III Jornadas de Invierno de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2024
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
La IgE media las reacciones anafilácticas, de ahí el interés en estudiar su mecanismo de síntesis,regulación y secreción. Hemos identificado en pólipos colorrectales juveniles (PJ) de pacientesalérgicos una inflamación tipo 2 y presencia de centros germinales sintetizadores de IgE.Proponemos que en la respuesta inflamatoria, la mucosa colónica induce la diferenciación alinfocitos B de memoria (LBmem)IgE+, los cuales pueden migrar y desarrollarse a célulasplasmáticas productoras de IgE. Dado que los LB presentan receptores para IgE, debemosdiferenciar las células productoras de IgE de las que la captaron en su superficie.Para distinguir los LB y LBmem IgE+, se optimizaron ensayos de inmunofluorescencia (IFI) ycitometría de flujo, respectivamente. Se emplearon anticuerpos a-hIgE policlonales comerciales(controles positivos, a-IgE FITC y Bv711), así como un anticuerpo monoclonal biotinilado a-hIgEproducido en el laboratorio (mAb) con estreptavidina-FITC, y el anticuerpo bloqueantemonoclonal humanizado Omalizumab (OM), el cual conjugamos a Alexa 488. Se realizaron IFIsen criocortes de PJ utilizando OM, mAb, a-IgE FITC y yoduro de propidio (tinción nuclear) y encitometría de flujo, se utilizaron PBMCs de personas alérgicas y se buscaron LBmem IgE+ usandomarcadores para CD45, CD19, CD27, CD138, IgD, y a-IgE Bv-711/OM/mAb. Ambos anticuerpos,OM y mAb, detectaron células con morfología similar a linfocitos en las IFIs, y no así otros tiposcelulares como eosinófilos. OM mostró resultados inespecíficos por citometría de flujo, mientrasque el mAb fue efectivo para detectar LBmem IgE+, en contraste con el control positivo.Nuestros hallazgos sugieren que el OM es útil para detectar células IgE+ por IFI. Mientras que elmAb demostró ser versátil, siendo efectivo en ambas técnicas (permitiendo la detección deLBmem IgE+). De esta manera, pudimos diferenciar las células IgE+ de las que presentan elcomplejo IgE-receptor, siendo fundamental para la identificación de los LBmemIgE+.
