INVESTIGADORES
DIAZ Luis Adrian
congresos y reuniones científicas
Título:
Brote de encefalitis por Flavivirus en la ciudad de Córdoba (Argentina) en la temporada verano-otoño 2005: aislamiento de Flavivirus y evidencias serológicas en aves
Autor/es:
L A DIAZ; V. RE; L. I. SPINSANTI; A. A. FARIAS; M. A. MORALES; B. S. KONIGHEIM; J. AGUILAR; A. M. VISINTIN; S. LEVIS; W. R. ALMIRÓN; M. S. CONTIGIANI
Lugar:
CABA, Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; VIII Congreso Argentino de Virología; 2005
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Virología
Resumen:
Brote de encefalitis por Flavivirus en la ciudad de Córdoba (Argentina) en la temporada verano-otoño 2005: aislamiento de flavivirus y evidencias serológicas en aves. L. A. Diaz1,  V. Re1,  L. I. Spinsanti1, , A. A. Farias1, M. A. Morales3,  B. S. Konigheim1, J. Aguilar1, A. M. Visintin2, S. Levis3, W. R. Almirón2, M. S. Contigiani1. 1Laboratorio de Arbovirus y Arenavirus, Instituto de Virología “Dr. J. M. Vanella”, Facultad de Ciencias Médicas. 2Centro de Investigaciones Entomológicas de Córdoba, Facultad Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Universidad Nacional de Córdoba. 3 INEVH, Pergamino, Buenos Aires.  ladriandiaz@yahoo.com.ar   De los Flavivirus en Argentina, existen antecedentes de actividad para los virus Bussuquara, Dengue,  Encefalitis San Luis (ESL) e Ilheus. El virus ESL es el que habitualmente se encuentra asociado a la producción de síndromes neurológicos en humanos. Este virus se encuentra ampliamente distribuído en nuestro país, tanto en regiones subtropicales como templadas.Ha sido aislado a partir de mosquitos Culex (Cux.) spp, microroedores Mus spp y Calomys spp y de humanos, sin  estár  totalmente caracterizados aún los integrantes del ciclo de transmisión y mantenimiento. Se realizaron capturas de mosquitos y sangrado de aves de corral con el objetivo de detectar la actividad de flavivirus en la residencia de un paciente con encefalitis por Flavivirus ubicada en el área central de la ciudad de Córdoba. La captura de mosquitos se realizó el 16 de febrero   utilizando  trampas de luz tipo CDC suplementadas con hielo seco. Las aves fueron sangradas por punción de la vena yugular (pollitos) y alar (gansos y gallinas). Los mosquitos se determinaron taxonómicamente bajo platina refrigerada y se agruparon por especie. Cada grupo se homogeneizó  con medio esencial mínimo suplementado son suero fetal bovino al 20 % u antibióticos y centrifugó a 10.000 rpm por 30 min en centrífuga refrigerada. La detección del ARN viral de mosquitos se realizó mediante RT-Nested-PCR utilizando primers genéricos para Flavivirus y específicos para virus ESL, West Nile y virus Dengue. Los homogeneizados fueron inoculados en  monocapas de células VERO (células de riñón de mono verde africano). Los cultivos fueron observados para la detección de efecto citopático (ECP) durante 7 días. La identificación de las cepas aisladas se realizó utilizando RT Nested PCR con primers genéricos para ESL, Dengue y West Nile y mediante neutralización con sueros prototipos contra el virus ESL. Las muestras sanguíneas se centrifugaron a 5000 rpm por 15 min y se recuperó el suero. La detección de anticuerpos se realizó mediante el uso de la técnica de Neutralización de placas bajo agarosa, utilizando la cepa 78V-6507 del virus ESL. Se capturaron un total de 393 mosquitos: Aedes aegypti (2,8%), Culex interfor (12,98%), Cx. quinquefasciatus (83,97%) y Ochlerotatus albifasciatus (0,25%). De los 7 homogeneizados analizados, 3 resultaron positivos para ESL (2  de Cx. quinquefasciatus y 1  de Cx. interfor) y 1  de Ae. aegypti resultó positivo para Flavivirus y negativo para los virus ESL, Dengue y West Nile. Hasta el presente se aislaron 2 cepas virales a partir de dos muestras de Culex quinquefasciatus, que sólo resultaron positivas para el virus ESL mediante RT-Nested PCR. Las cepas virales fueron neutralizadas por un  liquido ascitico hiper inmune contra el virus ESL. En 13 de las 21 aves (62%) de corral analizadas se detectaron anticuerpos neutralizantes contra el virus ESL, tanto en “pollitos” (Gallus gallus) menores a 6 meses de edad como en “gallinas” (Gallus gallus) y “gansos” (Anser cinereus) adultos. Esta es la primera vez que se detectan y aislan cepas epidémicas del virus ESL en la Argentina, como así también es la primera vez que se encuentran mosquitos Cx. interfor infectados en la naturaleza con el virus ESL. Es interesante destacar un nuevo Flavivirus detectado en la provincia de Córdoba a partir de Ae. aegypti, vector de importantes arbovirus como Dengue y Fiebre Amarilla. Estos resultados aportan fuerte evidencia para incrimar al virus ESL como el agente causal de los casos de encefalitis por flavivirus en humanos ocurridos en la temporada verano – otoño 2005 en la ciudad de Córdoba.Los resultados presentados aportan evidencia ecológica importante que incrimina a Cx. quinquefasciatus como vector urbano del virus ESL para la Argentina y a las aves de corral como probables reservorios amplificadores. Futuros estudios relacionados con la competencia vectorial de estas especies de mosquitos frente a estas cepas virales aisladas permitirán aclarar su rol en los ciclos de transmisión, como así también se deberá estudiar el papel que cumplen las aves de corral (pichones y adultos) como hospedadores de este virus en nuestro país. Este trabajo fue realizado gracias al apoyo de Foncyt 01-12572, Fundación Roemmers e Institutos integrantes de la red de Virosis emergentes transmitidas por artrópodos y roedores del CYTED.