EFECTO DEL KLA EN LA PRODUCCION DE FRAGMENTO DE ANTICUERPO RECONBINANTE MEDIANTE PICHIA PASTORIS

CESAR DÍAZ ARIAS; LUCIANA PELLEGRINI MALPIEDI; VALKER FEITOSA; ADALBERTO PESSOA JR

Santos

Congreso; XXI Congresso Latinoamericano de Microbiologia (XXI ALAM); 2012

En los últimos anos los anticuerpos vienen destacándose como uno de los principales productos biotecnológicos del mundo moderno, debido a sus múltiples usos terapéuticos, diagnósticos y en Investigación. Pichia pastoris se ha destacado como una de las principales fuentes de producción por presentar alta densidad celular, poca producción de proteasas, y presentar un sistema de expresión eucariota que permite un mejor plegamiento de proteínas heterólogas. En este trabajo se evaluó la producción del fragmento de anticuerpo scFv anti LDL ox a partir de un cultivo con distintos valores de coeficiente volumétrico de transferencia de masa (KLa). La producción del anticuerpo se realizo en fermentador de 2L utilizando el medio de cultivo BMGY. La fase de crecimiento se realizo a 30℃ por 32 horas, posteriormente se realizo inducción con metanol 0.5% cada 12 horas con un total de 96 horas de producción. Se trabajo con tres condiciones diferentes de KLa (82 h-1, 91h-1 y 97h-1) lo cuales fueron constantes durante la fase de crecimiento y producción. El rendimiento de producción fue calculado como gramo de anticuerpo producido por cada gramo de célula g/g. En los ensayos se observo que a mayor KLa se obtuvo mayor producción de anticuerpo y de biomasa. Por otra parte, los resultados de rendimiento calculados como producto/biomasa demostraron que con bajas condiciones de KLa aumento la producción del anticuerpo gramo/gramo con respecto a la biomasa. Según los resultados observados una mayor producción de biomasa generada por elevados valores de coeficiente de transferencia de masa (KLa) no resultaron en una mayor producción de anticuerpo.