CONTRATADOS
RETEGUI Lilia Alicia
congresos y reuniones científicas
Título:
“Caracterización de los anticuerpos (Ab) dirigidos contra un péptido sintético formado por el adyuvante denominado “PADRE” y un epitope presente en los receptores de la superfamilia de citoquinas tipo I”
Autor/es:
BELLOC CG, PEÑA C, MIRANDA, M.E, RETEGUI LA
Lugar:
La Falda, Córdoba
Reunión:
Congreso; LVI Congreso de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008
Institución organizadora:
SAI
Resumen:
El anticuerpo monoclonal (MAb) denominado R7B4 reconoce un epitope presente en los receptores de la superfamilia de citoquinas de tipo I, la cual involucra a las hormonas de crecimiento (GH), prolactinas e interleuquinas (IL) 2, 4, 6, 7, 9, 13, 15 y 21, entre otras. Hemos demostrado que dicho epitope puede ser representado por el péptido consenso His–Gly–Tyr–Trp–Ser–Glu–Trp–Ser–Pro-Glu. Con el propósito de obtener Ab policlonales que simularan la acción del MAb se inocularon ratones C57BL/6 con una secuencia sintética (denominada “péptido/PADRE”) formada por el péptido consenso y un adyuvante conocido como PADRE (por Pan HLA DR-binding Epitope), el cual intensifica la reactividad inmunológica de diferentes haptenos. PADRE: a–Lys-X-Val–Ala–Ala–Trp–Thr-Leu–Lys–Ala-Ala-a-Z–Cys (a indica D-alanina, X ciclohexilalanina y Z el ácido aminocaproico). Se determinó que los ratones inmunizados con el péptido/PADRE desarrollaban Ab anti-péptido y anti-PADRE. Los títulos anti-péptido resultaron ser significativamente mayores que los hallados en los animales inmunizados sólo con el péptido; los títulos anti-PADRE fueron similares a los controles (animales inoculados con PADRE). Varios receptores recombinantes se insolubilizaron en placas de ELISA y se enfrentaron con los Ab anti-péptido/PADRE. Los resultados indicaron que los Ab reconocían los receptores para IL-6, 13a1, 13a2 y gp130, mientras que no se unieron a los receptores de IL-2 e IL-4; los Ab anti-PADRE no detectaron ninguno de los receptores utilizados. Experimentos de unión de GH humana (hGH) a sus receptores demostraron que los Ab anti-péptido/PADRE inhibían la interacción de la 125I-hGH con microsomas de hígado de rata (p<0,001) y conejo (p<0,0003), mientras que los Ab anti-PADRE no produjeron ningún efecto. Además, se realizaron experimentos de inmunocitoquímica con las líneas WISH (amnios humano) y MCF7 (tumor mamario humano) en los cuales se observó que los Ab anti-péptido/PADRE reaccionaban en forma semejante al MAb R7B4 y con mucha mayor intensidad que los Ab anti-PADRE. Se concluye que la utilización del péptido consenso unido a la secuencia PADRE aumenta considerablemente la respuesta anti-péptido  y que dichos Ab simulan la acción del MAb R7B4. Finalmente, puesto que ratones inmunizados con el péptido/PADRE y desafiados con ovoalbúmina presentaron mayores títulos de Ab que los inmunizados con PADRE, se sugiere que los Ab contra el péptido consenso podrían actuar como inmunomoduladores.
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