CONTRATADOS
RETEGUI Lilia Alicia
congresos y reuniones científicas
Título:
Determinación del epitope reconocido por un anticuerpo monoclonal (MAb) dirigido contra receptores de varias citoquinas
Autor/es:
LONGHI SA, BELLOC CG, PEÑA C, CORTÉS MM, RETEGUI LA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004
Institución organizadora:
SAI-SAIC-SAFE-SAB-SAN-SAF
Resumen:
En un trabajo previo caracterizamos al MAb R7B4 y demostramos que está dirigido contra un epitope compartido por los receptores para hormonas de crecimiento (GH), prolactinas (PRL), interleuquina (IL) 2 e IL6. El MAb inhibe la unión de estos ligandos a sus receptores específicos, los cuales se encuentran agrupados en la llamada ?superfamilia de receptores para citoquinas? debido a que en la región extracelular contienen cuatro cisteínas cercanas al N-terminal y un motivo de Trp-Ser-X-Trp-Ser (X=cualquier aminoácido). Con el propósito de establecer cuál era el epitope reconocido por el MAb R7B4 se eligieron decapéptidos, correspondientes a los receptores para GH, PRL, IL2, IL4, lL5, IL6 e IL7 de diferentes especies, que contenían el motivo Trp-Ser-X-Trp-Ser.  Mediante la técnica denominada PEPSCAN se sintetizaron dichos decapéptidos en fase sólida y se midió su unión al MAb R7B4 por ELISA. De los treinta y cuatro péptidos sintetizados, veinticuatro fueron reconocidos por el MAb, resultados que permitieron establecer la secuencia consenso His-Gly-Tyr-Trp-Ser-Glu-Trp-Ser-Pro-Glu para el epitope reconocido por el Ab. Posteriormente se preparó el péptido sintético Gly-Tyr-Trp-Ser-Glu-Trp-Ser-Pro-Glu, el cual se utilizó como inmunógeno en ratones para obtener sueros que simularan la acción del MAb R7B4. Resultados preliminares indican que la unión de la 125I-hGH a los receptores presentes en hígado de rata disminuye en presencia de dichos sueros. Los resultados obtenidos hasta el momento indican que la secuencia consenso determinada por PEPSCAN representaría el epitope reconocido por el MAb R7B4.
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