SALIDA DE ATP EN ERITROCITOS HUMANOS FRENTE A PÉPTIDOS DE INTERÉS FISIOLÓGICO Y FISIOPATOLÓGICO

L.Z.F. GROSS; S. VENERUS ARBILLA; N. LAURI; CORA L. ÁLVAREZ; PABLO JULIO SCHWARZBAUM; LEAL DENIS M F

La Plata

Congreso; REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGÍA; 2016

SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGÍA

Los eritrocitos humanos (GR) liberan ATP al medio extracelular en respuesta a una variedad de estímulos fisiológicos y patológicos. El ATP extracelular (ATPe) resultante puede ser hidrolizado por una o varias ectonucleotidasas, lo que resulta en una cinética de acumulación de ATPe.Analizamos esta cinética de ATPe en GR expuestos a potenciales inductores de la salida de ATP, como el fragmento 1-40 del péptido β-amiloide (Aβ40), la melitina (MEL) y el mastoparán 7 (MST7).Dado que la adhesión a sustratos adherentes puede modular la salida de ATP de GR, los experimentos se realizaron tanto en células no adheridas como en células adheridas a poli-D-lisina. Ademas, se monitoreó el grado de hemolisis para evaluar el componente litico de la salida de ATP.En GR adheridos, la exposición a 1,56 μg/ml de Aβ40 (similar a concentraciones plasmáticas) incrementó la [ATPe] de 1,3 ± 0,7 a 2,8 ± 0,5 pmol/106 células, mientras que con MST7 el aumento fue de 1,9 ± 0,4 a 5,6 ± 0,1pmol/106 células. En GR sin adherir Aβ40 y MST7 no indujeron cambios en la [ATPe]; sin embargo, cuando el péptido Aβ40 fue envejecido 72 hs a 37°C, lo que induce la formación de oligómeros, se observó un incremento agudo de 17% de la [ATPe], alcanzándose un máximo de 0,32 pmol/106 células. Este aumentó correlacionó en gran medida con un incremento de la hemolisis. Por otro lado, frente a MEL se observó un incremento en la [ATPe] dosis-dependiente, con niveles crecientes de hemolisis.Los resultados sugieren que, en GR la adhesión celular es un pre-estímulo necesario para inducir la salida de no lítica de ATP por MST7 y Aβ40. Alternativamente, en ausencia de adhesión, se evidencia salida lítica de ATP a altas concentraciones de MEL, y con Aβ40 envejecidos. Estas condiciones son compatibles con la formación de poros citotóxicos.Con subsidios UBACYT (20020100100090), CONICET (PIP1187 y PIP 639) y ANPCyT (2014-0327), PDTS-CIN 193.