INVESTIGADORES
LEAL DENIS Maria Florencia
congresos y reuniones científicas
Título:
ESTUDIOS DE SORCIÓN DE SEROALBÚMINA BOVINA EN MATERIALES POLIMÉRICOS
Autor/es:
MARÍA FLORENCIA LEAL DENIS; JUAN MANUEL LÁZARO MARTÍNEZ; GRACIELA YOLANDA BULDAIN; VIVIANA CAMPO DALL ORTO
Lugar:
Lima.
Reunión:
Congreso; XI Simposio Latinoamericano y IX Congreso Iberoamericano de Polímeros; 2008
Institución organizadora:
Pontificia Universidad Católica del Perú
Resumen:
En los últimos años se han visto incrementados los diseños de métodos de separación para la purificación de proteínas; los mismos ofrecen una manera rápida y sencilla para el aislamiento de proteínas de importancia biológica. Entre los adsobentes más comúnmente utilizados se encuentran los materiales poliméricos, destacándose aquellos que poseen grupos epóxido en su estructura ya que proveen una manera fácil de inmovilizar ligandos de diversa naturaleza. Por otra parte, el uso de derivados imidazólicos permite obtener elementos de reconocimiento de biomoléculas gracias a sus propiedades coordinantes sumado a su capacidad buffer en el rango de pH fisiológico. Un grupo de particular interés son los polianfolitos . En resultados previos de nuestro grupo de investigación se ha reportado la síntesis de dos materiales poliméricos insolubles y no porosos con propiedades de polianfolito (Pol A) ó polielectrolito (Pol B), sintetizados a partir de etilenglicol diglicidil éter (EGDE), ácido metacrílico (MAA) y en presencia ó ausencia de 2-metilimidazol (2MI) respectivamente [1-2]. Se realizó un estudio comparativo entre los materiales poliméricos A y B, junto a otros reportados en la literatura, frente a la adsorción de seroalbúmina bovina (SAB). La máxima capacidad de carga de SAB obtenida para el Pol A en su forma básica fue de 742 mg/g, mostrando buena correlación con q0 obtenida de la ecuación de Langmuir, siendo significativamente mayor a los valores obtenidos para otros polianfolitos (30 mg/g) [3], polielectrolitos (93 mg/g) [4] y materiales neutros (186 mg/g) [5] empleados como matrices insolubles para la separación de proteínas. En nuestros experimentos de unión, tanto la proteína como el Pol A presentan carga neta negativa, pero la presencia de algunos dominios con carga positivas en ambas especies es la causa probable de la estabilidad del complejo. A su vez, coexisten interacciones de atracción de rango corto con fuerzas repulsivas de amplio rango a un pH lejano del punto isoeléctrico y a baja fuerza iónica. Por otra parte, el Pol B en su forma básica presentó nula capacidad de carga. La interacción entre la SAB y el material fue estudiada por espectroscopía de FT-IR y microscopía electrónica de escaneo (SEM). Las isotermas de adsorción de SAB en agua deionizada para la forma básica del Pol A se ajustaron a la ecuación de Langmuir (a) y de Mc Ghee-von Hippel (b) y se muestran en la Figura 1 y Tabla 1. Asimismo, se estudió la desorción de la proteína en función de la fuerza iónica (I) y pH del medio, tanto para analizar la naturaleza de la unión, como para evaluar la aplicabilidad de estos complejos en la separación de proteínas y sistemas de liberación. La alta correlación entre los datos experimentales y el modelo de desorción de segundo orden empleado, confirmó que la liberación de SAB es regida por una cinética de disociación por sobre un proceso difusional. Se encontró una liberación próxima al 100% a I > 0.2M y 6.0 < pH < 8.0, mientras que en NaOH 0.1M sólo un 43% fue liberado debido a que en estas condiciones de alcalinidad la SAB sufre cambios conformacionales que probablemente refuercen la unión de la proteína al polianfolito [6].