“Adsorción de proteínas en soportes biopoliméricos: Impacto de la agregación en la cuantificación mediante métodos de UV/visible”

V. LASSALLE; S.PIRILLO; E.RUEDA; M.L.FERREIRA

Viña del Mar

Congreso; XXII CICAT – Congreso Iberoamericano de Catálisis; 2010

En este trabajo se analizan los inconvenientes surgidos en la cuantificación de  proteínas/enzimas por métodos de espectrofotometría UV/Visible en los procesos de inmovilización y adsorción. Los sistemas explorados están formados por  quitosano, celulosa y materiales compuestos quitosano/magnetita y celulosa/magnetita como soportes; y albúmina bovina (BSA), insulina(Ins.), lipasa de Rhizomucor meihei (RML), lipasa de Candida Rugosa (CRL) y Peroxidasa de rábano picante (HRP) como proteínas y enzimas. Se determinó que los inconvenientes se deben principalmente a la agregación de las proteínas en solución tanto de buffer de fosfato (pH=7) como en agua bidestilada. La agregación es fuertemente dependiente del peso molecular y de la concentración de proteína. Se encontró que el mecanismo de agregación es reversible y puede revertirse mediante simple agitación magnética de las soluciones de las proteínas. Se realizó satisfactoriamente la adsorción de BSA e Ins. en los soportes mencionados mostrando los niveles de error que podrían alcanzarse si el fenómeno de agregación no fuese tenido en cuenta.