Utilización de sistemas micelares benignos al ambiente para la recuperación primaria de papaína

DI GIACOMO, MELISA; ROCHA, M. VICTORIA; NERLI, BIBIANA BEATRIZ

Aracaju

Simposio; I Simposio Iberoamericano de Sistemas Bifásicos Acuosos; 2018

El considerable incremento del uso de enzimas en numerosos procesos productivos ha impulsado el desarrollo de nuevas estrategias bioseparativas sencillas, rápidas, no contaminantes y escalables que permitan recuperar enzimas de importancia biotecnológica. En este trabajo se evaluó la aplicación de sistemas bifásicos acuosos micelares (SBAMs) compatibles con el medioambiente, formados por los surfactantes Tritón X-114 (TX-114) y Genapol X-080 (GX-080), en la recuperación de papaína (PAP) a partir de látex de Carica papaya. La PAP es una fitoproteasa muy demandada por su aplicación en las industrias cerveceras, en frigoríficos, curtiembres y en panificadoras. Se ensayaron repartos en SBAMs a distintas temperaturas de modo de asegurar la separación de fases y evaluar el contenido de PAP en fase acuosa y en fase micelar. En los repartos del látex en todos los SBAMs seleccionados, la enzima se distribuyó preferentemente hacia la fase acuosa, con rendimientos superiores al 60%. Los factores de purificación en dicha fase también alcanzaron valores satisfactorios. El estudio del reparto de azúcares reductores (AR) presentes en el látex permitió observar que en el sistema formado por GX-080 a 42 °C, PAP podía ser obtenida con bajo contenido de este tipo de azúcares, ya que los ARs se repartieron preferentemente hacia la fase micelar, contraria a la que contiene a la enzima (acuosa). Nuestros resultados señalaron que el SBAM formado por GX-080 (4,00% P/P) e incubado a 42°C se presentó como el mejor para la extracción de PAP ya que permite recuperar el 80% de la enzima de interés en fase acuosa y purificarla 4 veces. Esta técnica resulta ventajosa ya que utiliza un surfactante biodegradable aceptado por la FDA para consumo humano, permitiendo en una única operación integrar el clarificado, la concentración y la purificación del bioproducto sin necesidad de tratamientos previos del extracto vegetal.