ESTUDIO DE LOS SISTEMAS BIFÁSICOS ACUOSOS FORMADOS POR POLIETILENGLICOL Y TARTRATO DE POTASIO.

FERNÁNDEZ CINTIA; PELLEGRINI MALPIEDI, LUCIANA; PICÓ GUILLERMO; NERLI BIBIANA

Rosario

Congreso; XXVII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2007

Sociedad de Biología de Rosario

ESTUDIO DE LOS SISTEMAS BIFÁSICOS ACUOSOS FORMADOS POR POLIETILENGLICOL Y TARTRATO DE POTASIO. Fernández, Cintia; Pellegrini Malpiedi, Luciana; Picó, Guillermo A.; Nerli, Bibiana B. Laboratorio de Bioseparación. Dpto.Química-Física. Fac.de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. UNRosario. E-mail: bnerli@fbioyf.unr.edu.ar   La  extracción líquido-líquido con sistemas bifásicos acuosos (SBAs) constituye un método de purificación de uso creciente en los últimos años. El desarrollo y caracterización de nuevos SBAs con propiedades superadoras de los ya empleados contribuye a afianzar la metodología y ampliar su espectro de aplicación. El objetivo de este trabajo es la caracterización y estudio de las propiedades de reparto de los SBAs formados por polietilenglicol (PEG) y una sal de anión biodegradable, el tartrato de potasio (Tart). Se obtuvieron, mediante titulación turbidimétrica, las curvas binodiales correspondientes a SBAs formados por Tart pH 5,0 y PEGs de diferentes pesos moleculares promedio (PM): 600, 2000, 3350, 6000 y 8000, y se determinaron las líneas de unión correspondientes a SBAs de diferentes composiciones totales iniciales. Se estudiaron los perfiles de reparto de cinco proteínas modelo: amilasa (AMY), albúmina sérica bovina (ASB), lisozima (LISO), quimotripsina (QTRP) y tripisina (TRP).  Se observó que el aumento en el peso molecular del PEG produce un desplazamiento de la curva binodial hacia los ejes coordenados indicando una disminución de las concentraciones críticas necesarias para originar las dos fases. Este comportamiento se debe a un fenómeno de exclusión por aumento de tamaño de la molécula de polímero. Las líneas de unión determinadas se mostraron paralelas, siendo ésta una condición conveniente para la determinación de las concentraciones de equilibrio de SBAs de diferentes composición total inicial. El coeficiente de reparto (Kr) resultó ser dependiente del tamaño de la molécula que se reparte. Para proteínas de bajo PM, como LISO (PM 14000), el equilibrio de reparto se mostró desplazado hacia la fase rica en polímero mientras que para BSA (PM 69000) se observó el comportamiento contrario. El resto de las proteínas ensayadas, cuyos PM se hayan comprendidos entre los de LISO y BSA evidenciaron patrones de comportamiento intermedios. La disminución de la longitud de la línea de unión y el incremento en el PM del PEG produjeron un sensible decrecimiento en el valor de Kr. Finalmente se concluye que los SBAs PEG/Tart además de mostrar  características similares a los SBAs tradicionales en cuanto a la composición de sus fases y facilidad de predecir las composiciones de equilibrio, son altamente sensibles a las características estructurales de las proteínas que se reparten así como a la composición del SBA (PM y concentración del PEG). Esto los posiciona favorablemente en su futura aplicación en  la purificación proteica.