Rol de la palmitoilacion en la proteína HSP20 en Toxoplasma gondii

DE NAPOLI MG; ANGEL SO; MORENO SN; CORVI MM

Ascochinga, Cordoba, Argentina

Congreso; XXIV Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Protozoologia; 2010

Sociedad Argentina de Prozoologia

Toxoplasma gondii es un parásito intracelular obligado y un patógeno humano de importancia. Un paso determinante de la infección y patogenia del parásito es su capacidad de invadir casi cualquier tipo de célula. Para ello utiliza diversas proteínas presentes en su membrana, las cuales interaccionan con las proteínas presentes en el complejo interno de membranas (IMC), permitiéndole desplazarse e invadir la célula hospedadora. Un posible mecanismo que localiza proteínas en membrana es la palmitoilación de las mismas, la cual involucra la unión de palmitato (C16:0) a residuos de cisteínas mediante un enlace tioester. TgHSP20 presenta una localización en la película del parásito (membrana e IMC), mientras que carece de péptido señal o dominios transmembrana. Analizando la secuencia aminoacidica, se observó que TgHSP20 presenta 3 residuos de cisteínas en su secuencia. Mediante experimentos utilizando parásitos marcados metabólicamente con palmitato tritiado, se demostró que TgHSP20 se palmitoila in vivo. Los resultados indican que la palmitoilación estaría ocurriendo en las cisteinas en posición 3, 4 y 160. Se obtuvieron parásitos que expresan de manera estable distintas versiones mutantes de TgHSP20. Mediante ensayos de inmunofluorescencia indirecta y solubilidad en detergentes, se observó que los residuos de cisteínas son importantes para la correcta localización de TgHSP20. En particular, la ausencia de cisteínas en posición 3 y 4 genera una pérdida de asociación de TgHSP20 con la pelicula en parásitos maduros, dado que presenta una correcta localización en parásitos nacientes durante el proceso de endodiogenia.