METODOLOGÍA DE RECUENTO DIGITAL DE CHLORELLA VULGARIS, UNA EXPERIENCIA EN LABORATORIO

FERRANDO, N; BENÍTEZ, H. H.; CLAPS, M. C.; GABELLONE, N. A.

Aguas Calientes

Congreso; XVIII REUNIÓN NACIONAL DE LA SOCIEDAD MEXICANA DE PLANCTOLOGÍA ; XI INTERNATIONAL MEETING OF THE MEXICAN SOCIETY OF PLANKTOLOGY; 2014

El alga unicelular Chlorella vulgaris común en el fitoplancton en ambientes pampásicos de la Argentina, es una de las algas más utilizada a nivel experimental. Entre las diversas metodologías propuestas para los recuentos de las células algales existen los métodos automatizados por medio de contadores electrónicos, las mediciones de turbidez que permiten inferir el número celular y los recuentos directos a microscopio en cámaras de Neubauer. En este trabajo se pretende exponer una metodología alternativa de conteo mediante la utilización de imágenes digitalizadas, que permitan determinar con precisión y rapidez el número de individuos en un volumen determinado. Para ello se realizó en laboratorio un experimento para observar el efecto de pastoreo del rotífero Brachionus plicatilis sobre C. vulgaris en condiciones controladas (23ºC y fotoperiodo 14/10 h, con agitación orbital ). Los tratamientos (presencia/ausencia de rotífero pastoreador) se realizaron por triplicado y se extrajeron a diario alícuotas para el recuento algal. El experimento finalizó al cabo de cinco días. La densidad de los rotíferos se determinó por recuento al microscopioóptico. Para el recuento algal se tomaron imágenes digitales bajo microscopio invertido de las alícuotas previamente fijadas con Lugol y sedimentadas en las cámaras de Utermohl. Posteriormente estas imágenes fueron procesadas con el programa libre lmage J (v 1.47) que permite tanto el recuento, como la medición de cada partícula de manera automatizada. El pastoreo promedio varió entre 6,2 x 104 y 80 x 104. El efecto de pastoreo fue evidente y resultó estadísticamente significativo a lo largo del experimento. La metodología presentada fue precisa para evaluar la densidad algal, permitiendo muy bajos niveles de error en el recuento celular. La población del rotífero y la presencia de huevos se incrementó a lo largo del tiempo. El método resulto fácil para estudiar el pastoreo por los rotíferos.