INVESTIGADORES
FOSSATI Carlos Alberto
congresos y reuniones científicas
Título:
Utilidad de proteínas del sistema de secrecion tipo iv de brucella para el diagnóstico de brucelosis humana y animal
Autor/es:
POLLAK C; DELPINO MV,; FOSSATI, CA; BALDI PC,
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y LIV Reunión Científica de la SAIC; 2009
Institución organizadora:
SAI SAIC
Resumen:
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623 (558) UTILIDAD DE PROTEÍNAS DEL SISTEMA DE SECRECION
TIPO IV DE BRUCELLA PARA EL DIAGNÓSTICO
DE BRUCELOSIS HUMANA Y ANIMAL. Pollak C.1;
Delpino M.2; Fossati C.3; Baldi P.4
IDEHU Facultad de Farmacia y Bioquímica UBA1 2 3 4
<coralinaus@hotmail.com>
La supervivencia intracelular de Brucella se debe a factores
de virulencia secretados a través de un sistema de secreción tipo
IV (SST4), codificado por 12 genes del operón VirB. En este trabajo
evaluamos si durante la infección con Brucella se producen
anticuerpos contra las proteínas VirB7 y VirB9 del SST4, haciendo
posible su uso como antígenos en ensayos diagnósticos. Las
proteínas fueron obtenidas en forma recombinante en E. coli fusionadas
a una cola de 6-His y purificadas por columnas de Ni-
NTA. Con estas proteínas se diseñaron ensayos de ELISA indirecto
para la detección de anticuerpos específicos en humanos y
caninos infectados. Se analizaron los sueros de 34 pacientes con
brucelosis documentada. Fueron positivos para anticuerpos anti-
VirB7 20 pacientes (59%) y para anti-VirB9 15 pacientes (44%).
Notoriamente, 6 pacientes negativos para anti-VirB7 fueron positivos
para anti-VirB9, con lo cual el total de enfermos positivos
para uno o ambos ensayos fue de 26 (76%). Se analizaron también
muestras seriadas de 12 perros con infección documentada,
totalizando 62 sueros. Los anticuerpos anti-VirB7 fueron siempre
positivos en 4 animales, fueron positivos en casi todo el seguimiento
en otros 6, y siempre negativos en 2. Para anti-VirB9
los números fueron 3, 5 y 4 perros, respectivamente. También en
los perros se hallaron casos positivos para anti-VirB7 y negativos
para anti-VirB9 (n = 15) y viceversa (n = 4), con lo cual el total de
sueros positivos para al menos uno de los ensayos fue de 47
(76%). Decidimos evaluar si un ELISA que combine ambos
antígenos tiene mayor capacidad de detección que cualquiera de
los ELISAs individuales. Nuestros resultados preliminares con
sueros caninos indican que esto es efectivamente así. Estos resultados
sugieren que las proteínas VirB pueden tener aplicación
diagnóstica en brucelosis. Recientemente hemos obtenido la proteína
VirB2 en forma recombinante y pensamos incorporarla a esta
evaluación.