INVESTIGADORES
FOSSATI Carlos Alberto
congresos y reuniones científicas
Título:
Apoptosis aumentada por tratamiento con globotriaosilceramida (Gb3) sobre células mononucleares de sangre periférica. Implicancias para la enfermedad de fabry
Autor/es:
DE FRANCESCO PN,; FOSSATI, CA; ROZENFELD, PA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y LIV Reunión Científica de la SAIC; 2009
Institución organizadora:
SAI y SAIC
Resumen:
349 (759) APOPTOSIS AUMENTADA POR TRATAMIENTOCON GLOBOTRIAOSILCERAMIDA (GB3) SOBRE CÉLULASMONONUCLEARES DE SANGRE PERIFÉRICA.IMPLICANCIAS PARA LA ENFERMEDAD DE FABRY. DeFrancesco P.1; Fossati C.2; Rozenfeld P.3LISIN, Facultad de Ciencias Exactas, UNLP1 2 3<nicolasdefrancesco@gmail.com>La globotriaosilceramida (Gb3) es un glicolípido neutro que seacumula en la Enfermedad de Fabry (EF), una enfermedad dealmacenamiento lisosomal causada por la deficiencia genética Xligadade la enzima lisosomal α-galactosidasa A. Los valoresplasmáticos de Gb3 en pacientes con EF se hallan en el rangode 2 a 50 ìM, mientras que en individuos sanos son menores a1,2 µM. Resultados preliminares de nuestro grupo indicarían laexistencia de un estado proapoptótico en células mononuclearesde sangre periférica (PBMC) de pacientes con EF. En el presentetrabajo se investiga los efectos del tratamiento con Gb3 sobrelos niveles de apoptosis de PBMC normales. Partiendo de sangreperiférica de sujetos normales, se aislaron PBMC medianteun gradiente de ficoll, y se cultivaron en presencia de Gb3 variandoel rango de concentraciones de 0 a 40 µM, por 48 hs, y a unaconcentración fija de 20 µM por diferentes tiempos, hasta 48 hs.Posteriormente se procedió a analizar los niveles de apoptosis deestas células mediante las técnicas de Anexina-V y TUNEL porcitometría de flujo. También se determinó el grado de despolarizaciónde la membrana mitocondrial (DMM) mediante JC-1. Enla cinética del tratamiento con Gb3 se observó un aumento en losniveles de apoptosis en linfocitos y monocitos, alcanzando losvalores máximos a las 6 hs para Anexina-V y 48 hs para TUNEL.Así mismo, el agregado de Gb3 produjo una DMM que fue máximaa las 6 hs. Los experimentos de dosis-respuesta con Gb3mostraron una dependencia de los niveles de DMM y apoptosisen linfocitos y monocitos al aumentar la dosis. Estos hallazgosmuestran un efecto directo de dosis patológicamente elevadas deGb3 sobre la fisiología de las PBMC, lo que podría sugerir un vínculocausal con la apoptosis observada en PBMC de pacientes.La observación de la disrupción del potencial mitocondrial medianteJC-1 indicaría la activación de la vía intrínseca de apoptosiscomo mediadora de este proceso.