INVESTIGADORES
ROZENFELD Paula Adriana
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio de los mecanismos fisiopatogénicos asociados a la patologia ósea en enfermedad de Gaucher.
Autor/es:
MUCCI J; SUQUELLI GARCIA, F; DE FRANCESCO, PN; SCIAN R; FOSSATI CA; DELPINO, MV; ROZENFELD PA
Lugar:
mar del Plata
Reunión:
Congreso; LV Reunión anual de SAIC; 2010
Institución organizadora:
Sociedad argentina de investigación clinica
Resumen:
La enfermedad de Gaucher (EG) es una patología genética de
almacenamiento lisosomal, causada por la deficiencia de la enzima
beta-glucosidasa (GBA). Las manifestaciones óseas incluyen
osteopenia y osteonecrosis. En la EG
se sabe que la inflamación es un factor clave en la patogénesis y se ha descripto
un aumento de marcadores de resorción ósea mediada por osteoclastos tales como
Catepsina K y TRAP. El objetivo es investigar si existe inducción de
osteoclastogénesis en dos modelos in vitro
de la EG, uno murino
utilizando macrófagos de la línea celular J774 (M) y uno humano mediante empleo
de células mononucleares de sangre periférica de individuos normales (H).
Las células M y H se cultivaron en presencia de Conduritol
β-epóxido (CBE), un inhibidor de la
GBA, con el agregado de diferentes concentraciones de LPS y
se midió la producción de IL-1β, TNF-α e IL-6 en los sobrenadantes de cultivo mediante
ELISA. Se observó un aumento de la secreción de citoquinas en los cultivos H
que contenían CBE y LPS con respecto a los que se trataron con LPS solo. En
cambio, no se detectó diferencias apreciables para los cultivos M.
Los sobrenadantes de los cultivos H y M se utilizaron para tratar
cultivos de monocitos humanos de la línea THP-1 y cultivos de precursores de
médula ósea en presencia de M-CSF, respectivamente. Se midió la inducción de
osteoclastogénesis mediante la determinación de TRAP y MMP-9, y la expresión de
los genes RANK, CTSK y CCL2 mediante qPCR.
Se observó un aumento en la inducción de osteoclastogénesis
para las células tratadas con sobrenadantes de células estimuladas con CBE con
respecto a los controles y un aumento aun mayor cuando se trataron con aquellos
que provenían de células estimuladas con CBE y LPS, en ambos modelos.
Como conclusión, ambos modelos in Vitro de Enfermedad de Gaucher exhibieron un aumento en la inducción
de osteoclastogénesis. El modelo humano, a diferencia del murino, mostró una
respuesta inflamatoria más acentuada.
