Marcadores de apoptosis en celulas mononucleares de sangre perif¨¦rica de pacientes con enfermedad de Fabry

DE FRANCESCO, PN; PROCOPIO D; FOSSATI CA; ROZENFELD PA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LV Reuni¨®n Anual de la SAI; 2007

Sociedad Argentina de Inmunologia

La Enfermedad de Fabry (EF) es un desorden gen¨¦tico ligado al X causado por la deficiencia de la actividad de la enzima lisosomal ¦Á-galactosidasa A, que conduce a la acumulaci¨®n intralisosomal de glicol¨ªpidos complejos en diferentes tejidos, siendo el m¨¢s abundante la globotriaosilceramida, Gb3. En la actualidad, el tratamiento especifico consiste en el reemplazo enzimatico (ERT). Para explicar en parte su fisiopatolog¨ªa se ha sugerido la existencia de un estado proinflamatorio cr¨®nico, similar al hallado en otras enfermedades de acumulaci¨®n lisosomal. El objetivo de este trabajo es analizar marcadores de apoptosis en c¨¦lulas mononucleares de sangre perif¨¦rica (PBMC) de pacientes con EF. Partiendo de muestras de sangre perif¨¦rica de pacientes con EF, con y sin tratamiento de reemplazo enzim¨¢tico (ERT), y de individuos normales, se estudi¨® por citometr¨ªa de flujo el estado de apoptosis, mediante las t¨¦cnicas de Anexina V-FITC y TUNEL. Para la primera se utiliz¨® sangre entera seguida de lisis de gl¨®bulos rojos, y para la segunda, se aislaron PBMC por centrifugaci¨®n en gradiente de Ficoll. Se distinguieron las diferentes subpoblaciones leucocitarias por sus caracter¨ªsticas FSC-SSC, y se analizaron los valores de intensidad media de fluorescencia (MFI) y porcentaje de c¨¦lulas con marcaci¨®n positiva (%FITC+) de los ensayos en pacientes con EF, expresando ambas cifras como cociente respecto de las muestras normales. Se hall¨® un aumento significativo respecto de la unidad (p<0,01) en %FITC+ para Anexina V en Granulocitos de pacientes con EF. Al comparar los resultados entre pacientes con y sin ERT, se observ¨® una disminuci¨®n de la MFI de Anexina en Linfocitos (p<0,05) asociada al tratamiento, observ¨¢ndose la misma tendencia en esta poblaci¨®n en el %FITC+ de Anexina, y MFI y %FITC+ de TUNEL. Los resultados indicar¨ªan la existencia de un estado de apoptosis exacerbado, que revierte parcialmente con la administraci¨®n de ERT.