Evaluación de la producción de paramilon en la cepa de Euglena gracilis WMSmL y Euglena gracilis UTEX 753.

RUIZ L., ROCCHETTA I., RÍOS DE MOLINA M.C., CONFORTI V.

Buenos Aires

Congreso; 1º Congreso Latinoamericano sobre Biotecnología Algal.; 2004

Universidad de Buenos Aires

Los euglenofitos almacenan como carbohidrato de reserva una sustancia denominada paramilon (b-1,3- glucano). Este tiene una estructura compleja fibrilar rodeada por una membrana simple, que en las células se lo observa como gránulos altamente cristalinos. El objetivo de este trabajo consistió en evaluar comparativamente la producción de paramilon en dos cepas mutantes no fotosintéticas Euglena gracilis BMATEsL y Euglena gracilis BZ753EsL. Se compararon los resultados obtenidos con los producidos por sus formas autotróficas (Euglena gracilis MAT y Euglena gracilis Z, UTEX), y con datos bibliográficos referidos a otras cepas. Los ensayos se realizaron utilizando distintos medios de cultivo. Un medio orgánico (EGM, pH 7) y dos inorgánicos con acetato de sodio como fuente de carbono (Buetow, pH 7 y Cramer & Myers, pH 4). Las mediciones se realizaron a las 24 y 96 hs de cultivo. Para la extracción de paramilon se utilizó una solución 1% (p/v) de SDS y 5% (p/v) de EDTANa2. Los granos de paramilon aislados fueron filtrados a través de una membrana millipore APFC y llevados a peso seco. Los resultados se expresaron en mg de paramilon/105 células. Se verificó el grado de purificación realizando el análisis de proteínas totales. Se evaluó también el contenido de azucares totales a fin de estimar el porcentaje correspondiente al paramilon con respecto a ese total. El grado de purificación alcanzado de paramilon fue de aproximadamente un 99%, resultando mayor en los cultivos crecidos en EGM. La cantidad obtenida correspondió a un 40-50% del contenido total de los azúcares de las células. La mayor producción se midió en la cepa Euglena gracilis WMATSmL (192 mg paramilon/105) a las 24 hs (etapa lag del cultivo) crecida en  medio EGM, mientras que esta fue significativamente menor en los cultivos desarrollados en medio Cramer & Myers. La composición del medio resultó ser un factor importante en la producción de esta sustancia. Las dos cepas blanqueadas mostraron mayor producción que sus formas autotróficas, y también que las reportadas en otros trabajos.