Sistemas bifásicos micelares de tritón: formación y análisis del perfil de reparto de macromoléculas

ROCÍO GOÑI; ESTEFANÍA CORDISCO; CARLA N. HAIDAR; LUCIANA P. MALPIEDI; ADALBERTO PESSOA JUNIOR; BIBIANA B. NERLI

Zavalla, Santa Fe

Congreso; Congreso y XXXIII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario (SBR); 2013

Sociedad de Biología de Rosario. Facultad de Ciencias Agrarias, UNR.

Por encima de cierta temperatura crítica llamada punto de turbidez (PT), las soluciones acuosas de los surfactantes no-iónicos Tritón X-114 (TX-114) y Tritón X-100 (TX-100) originan sistemas de dos fases, una de ellas rica y la otra pobre en micelas del detergente. En los últimos años ha crecido la aplicación de estos sistemas micelares bifásicos (SMs) en la extracción de vitaminas, antibióticos y proteínas de membrana,pero aún está pendiente una completa descripción del equilibrio de fases y del mecanismo de reparto molecular. El objetivo de este trabajo fue obtener los diagramas de fase de los SMs de TX-114 y TX-100, analizar el efecto de la presencia de los aniones cosmotrópicos citrato (Cit) y tartrato (Tart) y estudiar el comportamiento de reparto de biomoléculas de importancia industrial en los mencionados SMs. Los diagramas de fase se obtuvieron por titulación turbidimétrica, la concentración micelarcrítica (cmc) de TX-100 y de TX-114 se estimó empleando la sonda fluorescente ácido anilino naftalensulfónico. Los coeficientes de reparto (Krs) de isoflavonas, de soja (IF) y proteínas de distinto tamaño e hidrofobicidad superficial: lisozima, pepsina, tripsina, albúmina sérica bovina y bromelina fueron calculados por determinación de lasconcentraciones de equilibrio en cada fase. En presencia de Cit y Tart se redujeron los PTs de los SMs. La magnitud de la disminución guardó una relación directa con la concentración y el carácter cosmotrópico de anión utilizado, observándose valores de PT en el rango 20-30°C, apropiados para el reparto de moléculas termolábiles. Un comportamiento similar fue observado para los valores de cmc, los cuales descendieron desde 0,20/0,18 mM (TX-100/TX-114 en agua) hasta 0,05 mM en los medios con Cit y Tart. Los Krs medidos mostraron una tendencia de las IFs a repartirse hacia la fase rica en micelas (Kr << 1) y un comportamiento contrario para las proteínas ensayadas (Krs>1), siendo esto más acentuado en los SMs con Cit y Tart. Se postula un mecanismo de formación de micelas y separación de fases, entrópicamente conducido, dependiente del grado de estructuración del agua. La exclusión ejercida por la fase micelar hacia las moléculas de mayor tamaño condicionaría el equilibrio de reparto y tendría un rol decisivo en la separación de componentes en mezclas complejas.