DETECCIÓN DE STEC Y EPEC EN MEDIO AMBIENTE DE TAMBOS DE LA CUENCA LECHERA MAR Y SIERRAS

FERNÁNDEZ FELLENZ, DANIEL; ETCHEVERRÍA, ANALÍA INÉS; KRÜGER, ALEJANDRA

Tandil

Jornada; Jornadas de Investigación y Posgrado FCV-UNCPBA; 2022

Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA

Escherichia coli productora de toxina Shiga (STEC) causa enfermedades graves en humanos como Colitis Hemorrágica (CH) y Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) y Argentina es el país con mayor incidencia de SUH. Entre los factores de virulencia de STEC se encuentran las toxinas Shiga (tipo 1 y 2) codificadas en los genes (stx1 y stx2) y la proteína intimina (codificada por el gen eae), necesaria para producir la lesión de adherencia y borrado del enterocito (lesión A/E), entre otros. Los rumiantes son el principal reservorio de STEC y que puede transmitirse al hombre a través de la ingestión de alimentos o agua contaminados, o por contacto directo con estos animales o con su medio ambiente. Escherichia coli enteropatogénico (EPEC) produce diarrea acuosa en niños y ha sido responsable de varios brotes de diarrea a nivel mundial. EPEC produce también la lesión característica de A/E mediada por la intimina y como reservorios de esta bacteria se encuentran los bovinos, porcinos, pollos, entre otros. El medio ambiente puede ser una fuente de transmisión y diseminación de STEC y EPEC debido a la repetida contaminación fecal producida por los animales infectados. Por este motivo, se propuso estudiar la presencia de STEC y EPEC en 45 muestras de medio ambiente correspondientes a 12 tambos de la cuenca lechera Mar y Sierra. Entre estas muestras de ambiente se recolectaron: 14 de líquido de efluente, 14 de material solido de efluente, 11 de agua de bebederos de animales, 4 de agua de tanque australiano y 2 de agua de pozo. De estas muestras, 10 mL y 10 gr. de cada muestra líquida y sólida, respectivamente, fueron cultivadas en 100 mL de aguda de peptona por 24 hs a 37°C, y posteriormente 1 mL de cada cultivo fue cultivado en 30 mL de caldo LB por 24 hs a 37°C. Una alícuota de 10 μl de cada cultivo fue colocado en 500 μl de agua bidestilada para extracción de ADN (por lisis celular en caliente) y su posterior utilización para la detección por PCR de los genes stx1, stx2 y eae. De las 45 muestras de medio ambiente analizadas, 17 (37,7%) resultaron STEC positivas, 7 correspondientes a muestra de efluente líquido, 6 de efluente sólido, 2 de bebederos, 1 de agua de tanque australiano y 1 de agua de pozo. Todas las muestras fueron negativas al gen eae. De las muestras STEC positivas, 13 resultaron positivas a stx1, 3 a stx1-stx2 y 1 a stx2. Los resultados demuestran la importancia de los efluentes del tambo para la diseminación de STEC al medio ambiente en general. Esto permite una forma de transmisión de STEC y otras bacterias entre los bovinos debido a la continua contaminación fecal y a la supervivencia y crecimiento de la bacteria en el ambiente. En los próximos estudios se realizará el aislamiento y la caracterización de las cepas STEC, incluyendo tanto los genes de virulencia como de resistencia a antimicrobianos.