INHIBICIÓN DE BIOFILMS DE PATÓGENOS PRODUCTORES DE ENFERMEDADES DE TRANSMISIÓN ALIMENTARIA MEDIANTE EXTRACTOS ACTIVOS DE LACTIPLANTIBACILLUS PLANTARUM

GARCÍA, MAURO DANIEL; VELEZ, MARÍA VICTORIA; RUIZ, MARÍA JULIA; COLELLO, ROCÍO; PADOLA, NORA LÍA; ETCHEVERRÍA, ANALÍA INÉS

Tandil

Jornada; Jornadas de Investigación y Posgrado FCV-UNCPBA; 2022

Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA

Escherichia coli productora de Toxina Shiga (STEC), Salmonella Typhimurium y Staphylococcusaureus, son agentes involucrados en Enfermedades de Transmisión Alimentaria (ETA). Losbiofilms son estructuras que permiten a las bacterias resistir la acción de agentes desinfectantes yoptimizar el uso de nutrientes. La formación de biofilm contribuiría a la alta prevalencia de las ETA,gracias a la diseminación constante de células. Pueden formarse sobre alimentos, envases,utensilios, maquinarias y cañerías. El uso de bacterias generalmente consideradas como seguras(GRAS) o sus metabolitos como estrategia para reducir la acción de patógenos es una opciónpara la eliminación de biofilm. Lactiplantibacillus plantarum ha demostrado ser efectivo, debido asu metabolismo ácido y a la producción de péptidos antimicrobianos denominados plantaricinas.Se analizó el efecto inhibitorio de sobrenadantes libres de células (SLC) de cepas de L. plantarum(Lp 05 y Lp 21.2) sobre biofilms de STEC, S. Typhimurium y S. aureus. Se cultivó Lp en medioMan Rogosa Sharpe (MRS) a 37°C en microaerofilia durante 18 h, se centrifugó a 12.000 rpmdurante 30 min y se filtró por membrana de 0,22 µm obteniéndose el SLC. Se lo neutralizó conNaOH y se probó que su actividad inhibitoria es debida a sustancias peptídicas. Para estudiar laformación de biofilm, se utilizó la técnica de estimación de biomasa y tinción con cristal violeta(CV). Las cepas patógenas fueron cultivadas en medio Luria Bertani (LB) a una Densidad Óptica(DO600=0,5) se sembraron alícuotas de 10 µl en 190 µl de LB en placas estériles de 96 pocillos. Seincubó 48 h a 37°C recambiando el medio a las 24 h, se fijó con metanol, y tiñó con CV, se eluyóen etanol 96%, y se realizó la lectura de la DO570. Para estimar el efecto del SLC sobre laformación del BF, se reemplazaron 100 µl del volumen total con 100 μl de SLC. Se agregó alprincipio del ensayo para simular las condiciones tempranas de formación de biofilm o 4 h antesde la tinción con CV para simular un biofilm en etapa tardía de formación. La formación de biofilmse estimó mediante el promedio de las DO570 ajustadas por desviación estándar. La capacidadformadora de biofilm se definió como: no formadora, débil, moderada o fuerte. En condicionestempranas los SLC de Lp inhibieron la formación de biofilm en las tres cepas: STEC, S.Typhimurium y S. aureus. En condiciones tardías de formación, los SLC de Lp 05 y 21.2 inhibieronel biofilm de S. Typhimurium y S. aureus. En conclusión, los SLC de L. plantarum, presentaronefecto inhibitorio sobre la formación de biofilms bacterianos de patógenos involucrados en ETA.