Formación de biofilm en cepas Escherichia coli productor de Toxina Shiga serogrupo O91

VELEZ, MARÍA VICTORIA; COLELLO, ROCÍO; ETCHEVERRÍA, ANALÍA INÉS; VIDAL, ROBERTO MAURICIO; PADOLA, NORA LÍA

Asunción

Congreso; XXV CONGRESO LATINOAMERIANO DE MICROBIOLOGÍA V CONGRESO PARAGUAYO DE MICROBIOLOGÍA IX CONGRESO NACIONAL DE BIOQUÍMICA CLÍNICA I CONGRESO PARAGUAYO DE BIOQUÍMICA Y CIENCIAS DEL LABORATORIO; 2021

ALAM

Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) es considerado un patógeno emergente transmitido por alimentos asociado a colitis hemorrágica (CH) y Síndrome Urémico Hemolítico (SUH). STEC ha sido reconocida como responsable de un alto número de casos de ETA a nivel mundial, siendo Argentina el país con mayor incidencia. Su habilidad para colonizar al huésped es esencial para la patogénesis. Existe un grupo de STEC carente del locus LEE (LEE-negativas) que no poseen los genes necesarios para producir la característica lesión A/E, pero pueden poseer otros factores de virulencia adicionales, como aquellos presentes en el Locus de Adherencia y Autoagregación (LAA) que porta genes que participan en la adhesión y autoagregación, entre ellos hes. Los biofilms son comunidades complejas de microorganismos que crecen embebidos en una matriz orgánica polimérica autoproducida y adherida a una superficie viva o inerte otorgándole a los microorganismos que lo conforma mayor resistencia ante procedimientos de desinfección y limpieza y facilitando la propagación de dichos patógenos. En los últimos años las cepas pertenecientes al serogrupo O91 han sido asociadas a enfermedad severa en el humano, sin embargo no se encuentran dentro de los protocolos de detección en Argentina. Se reconoce que la variabilidad de perfiles de virulencia de STEC provoca la emergencia de cepas con factores genéticos aún desconocidos. El objetivo de este trabajo fue estudiar la formación de biofilms de cepas STEC O91 LAA-positivas. Se seleccionaron 16 cepas O91 LAA-positivas autóctonas aisladas de bovinos de tambo, bovinos de pastoreo y alimentos de origen avícola y dos cepas mutantes, una cepa O91 con la deleción de LAA (O91∆LAA), y una cepa O91 con deleción de hes (O91∆hes). Se realizó la formación de biofilm en placas de 96 wells en tres eventos independientes y por triplicado. La capacidad de formar biofilms en cada cepa independiente se estimó mediante tinción con Cristal violeta (0,1%) y lectura de densidad óptica (DO600). De acuerdo a las DO obtenidas, se clasifico a las cepas según su capacidad de formar biofilms en 4 categorías: no formadoras (NFB), débiles formadoras (DFB), moderadas formadoras (MFB), y fuertes formadoras de biofilms (FFB). Todas las cepas estudiadas (incluyendo las cepas mutantes) fueron clasificadas como FFB, aunque se observaron diferencias entre las DO de las cepas mutantes y las cepas autóctonas que no fueron significativas, a excepción de una de las cepas autóctonas, aislada de bovinos que presentó una diferencia significativa (p>0.014) con respecto a las cepas mutantes. Estos resultados permitirían resaltar la función de adherencia de LAA, y confirmar que las cepas O91 tienen una gran capacidad de formar biofilms. Consideramos importante tener en cuenta otros serogrupos no-O157 que deben ser incluidos dentro del diagnóstico debido a que han sido asociados a CH y SUH. Comprender los mecanismos de patogenicidad de STEC y especialemte en la prevención de la formación de este tipo de biofilms es importante para disminuir el impacto de estos patógenos en la salud pública