INVESTIGADORES
ESPELT Maria Victoria
congresos y reuniones científicas
Título:
La adhesión y polarización de células de carcinoma hepatocelular inducidas por galectina-1 son dos procesos relacionados.
Autor/es:
BACIGALUPO, ML; MANZI, M; CARABIAS, P; ELOLA, MT; MUÑOZ, M; DOMINICI, F; RABINOVICH, G; WOLFENSTEIN DE TODEL, C; ESPELT, MV; TRONCOSO, MF
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010
Resumen:
Título: LA
ADHESIÓN Y POLARIZACIÓN DE CÉLULAS DE CARCINOMA HEPATOCELULAR INDUCIDAS POR
GALECTINA-1 SON DOS PROCESOS RELACIONADOSAutores : BACIGALUPO, MARIA L(1);
Manzi, Malena(2); Carabias, Pablo(3);
Elola, Maria Teresa(4); Muñoz, Marina C(5);
Dominici, Fernando P(6); Rabinovich, Gabriel A(7);
Wolfenstein de Todel, Carlota(8);
Espelt, Maria V(9); Troncoso, Maria F(10)
IQUIFIB(1)(2)(3)(4)(5)(6); IBYME(7);
IQUIFIB(8)(9)(10)
Resumen
:
Resultados previos
indican que Galectina-1 (Gal-1), una proteína con afinidad por
β-galactósidos, promueve la adhesión y polarización de células de carcinoma
hepatocelular, HepG2. Para evaluar si estos efectos son específicos de Gal-1,
se investigó el efecto de otra galectina: Gal-3 aumentó el porcentaje de
células adheridas (142±10%) pero no tuvo efecto sobre la polarización
(determinada como canalículos biliares teñidos con faloidina-TRITC/100
células). Mediante Western blot, se demostró que Gal-1 induce la
fosforilación de ERK pero no de Akt mientras que no afecta los niveles de
expresión de las proteínas marcadoras de membrana apical, MDR1 y MRP2.
Para evaluar si la
polarización inducida por Gal-1 es un efecto secundario al aumento de
la adhesión o, si por el contrario, los mismos son dos efectos
independientes, se permitió la adhesión de las células sobre cubreobjetos
durante 4 h y luego a) se agregó Gal-1 recombinante (rGal-1) (7 µM) o b) se
transfectó con el siRNA específico (80 nM). Al agregar rGal-1 a las células
ya adheridas no se observaron diferencias significativas (134±3%) con
respecto al control (en ausencia de rGal-1; 94±15%). Entonces, la presencia de
rGal-1 al momento de plaquear las células es necesaria para promover un
aumento en la polarización (156±5%). Mediante Western blot, se determinó que
los niveles de expresión de Gal-1 disminuyeron significativamente con
respecto a los niveles de b-actina (65,70±2,22% y 52,68±6,26%) luego de 48 y
72h respectivamente. El siRNA control no tuvo efecto sobre la expresión de
Gal-1. El silenciamiento de Gal-1, 4h después de la adhesión, no produjo
diferencias significativas en la polarización (90±5%) respecto a las células
transfectadas con el siRNA control (104±15%).
En conclusión, nuestros
resultados indican que los efectos de Gal-1 sobre la polarización son
específicos, secundarios a los efectos sobre la adhesión, involucran la vía
de transducción de señales de ERK sin afectar la expresión de MDR1 y MRP2.
