Transformación de Eragrostis curvula mediada por Agrobacterium tumefaciens.

TERENTI C; DIAZ A; BREZNEC A; DIAZ PALEO A; V ECHENIQUE

Rosario

Congreso; XV Congreso Latinoamericano de Genética, XLI Congreso Argentino de Genética, XLV Congreso de la Sociedad de Genética de Chile y II Reunión Regional SAG-Litoral.; 2012

Sociedad Argentina de Genética

Eragrostis curvula (Schrad.) Nees es una gramínea perenne que constituye un importante recurso forrajero para regiones semiáridas, a pesar de que su calidad es limitada. Su modo reproductivo (apomixis) y la escasa variabilidad encontrada en relación a calidad forrajera limitan el uso de métodos convencionales de mejoramiento. Por ello, la transgénesis resulta una técnica atractiva para la producción de pasturas con propiedades mejoradas. Además, representa una herramienta adecuada para la validación de genes, especialmente aquellos relacionados con el modo reproductivo. El objetivo de este trabajo fue optimizar un protocolo de transformación estable mediada por A. tumefaciens para pasto llorón. Para ello se utilizaron diferentes fuentes de explanto (semillas maduras, embriones, yemas apicales y callos) provenientes de dos cultivares de E. curvula, Tanganyika y Kromdraii así como cepas de A. tumefaciens que difieren en su capacidad de virulencia (AGL0 y AGL1), ambas portando el mismo vector binario dotado de un gen reportero (uidA) y un gen de selección (bar) bajo los promotores Ubi1 y Act1, respectivamente. Las plantas que resistieron dos rondas de selección con el herbicida L-phosphinothricin (basados en la mínima concentración inhibitoria del agente selectivo determinada para esta especie vegetal) fueron evaluadas por PCR para la presencia del gen uidA en el genoma vegetal. Las 15 plantas PCR positivas (de un total de 78) fueron posteriormente analizadas por la técnica de Southern blot para confirmar su naturaleza transgénica y determinar el número de copias incorporadas.