Identificación de microRNAs en Taenia crassiceps utilizando una estrategia de alto rendimiento

PEREZ M; CUCHER M; MACCHIAROLI N; AVILA HG; ANCAROLA ME; VACA H; KAMENETZKY L; ROSENZVIT M

Congreso; XXVII Reunión Científica Anual, Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

Taenia crassiceps es un parásito cestode  cuyo ciclo biológico  involucra a carnívoros como hospedadoresdefinitivos.  Roedores y conejos  son los principales hospedadores intermediarios;aunque otras especies como los humanos pueden comportarse como hospedadoresaccidentales. Este platelminto es el modelo experimental de Taenia solium ya que comparten una gransimilitud morfológica y antigénica. Los microRNAs(miRNAs) son  RNAs  pequeños, no codificantes, reguladoresmaestros de la expresión génica que poseen un rol fundamental en el desarrollo,crecimiento parasitario  y en larespuesta a condiciones de stress.El objetivo deeste trabajo es identificar por primera vez miRNAs en cisticercos de Taeniacrassiceps, tratados con praziquantel (PZQ) a  dosis subletales y no tratados, mediantesecuenciación de alto rendimiento. Para realizar los experimentos se partióde tres réplicas biológicas y tres réplicas técnicas. Se realizaron ensayospara determinar la dosis subletal de PZQ con la que se trataron loscisticercos. Se extrajo ARN de tamaño menor a 200 bases, se realizó la transcripción reversa  y por medio de PCR punto final se analizó laexpresión de los miRNAs mir-71 y Bantam en cisticercos tratados con PZQ y sintratar. El repertorio completo de miRNAs está siendo obtenido por smallRNA-seq.En este trabajose realizó por primera vez la identificación de miRNAs de T.crassiceps con primers de Echinoccocusgranulosus, comprobando la presencia de miRNAs conservados entre estas dosespecies de cestodes.  La  futura comparación del repertoriocompleto  de RNAs pequeños in silico, con los repertorios de miRNAsde E. granulosus, Echinococcus multilocularis y Mesocestoides corti,  sumado al estudio de su rol biológico,permitirá evaluar el potencial de estas moléculas como futuros blancosquimioterapéuticos de enfermedades zoonóticas producidas por cestodes, como lahidatidosis y neurocisticercosis.