microRNAs de Echinococcus granulosus: comparación de su expresión en distintos estadíos de desarrollo del parásito.

PRADA L; CUCHER M; MACCHIAROLI N; KAMENETZKY L; ROSENZVIT M

Congreso; LVII Reunión Científica Anual SAIC ? LX Reunión Científica Anual SAI.; 2012

La hidatidosis quística es una enfermedad que afecta la salud pública a nivel mundial, siendo endémica en nuestro país. Su agente etiológico es el parásito cestode E. granulosus. Un mayor conocimiento de los mecanismos involucrados en su desarrollo sería de gran importancia médica y sanitaria, ya que podría contribuir a desarrollar nuevas estrategias antihelmínticas, métodos diagnósticos y/o vacunas. En nuestro laboratorio hemos identificado y caracterizado microRNAs (miRNAs) por primera vez en cestodes. Para muchos de ellos hay evidencia del rol fundamental que cumplen en la regulación de procesos biológicos vinculados al desarrollo. El objetivo de este trabajo es profundizar el estudio de los miRNAs mediante la caracterización de sus patrones de expresión en distintos estadíos del parásito obtenidos en modelos in vitro desarrollados en nuestro laboratorio. Para lograr este objetivo, se han construido dos genotecas de cDNAs de RNAs pequeños, una correspondiente al estadío de protoscolex y la otra a microquiste. Se han obtenido aproximadamente 2000 clones de cada genoteca. Se realizó PCR-colonia, cuyos resultados mostraron que los plásmidos contenían insertos de tamaño compatible al clonado de concatémeros de miRNAs. Los resultados obtenidos hasta el momento indican que la estrategia ha sido exitosa dado que se clonaron miRNAs de ambos estadíos. Se han secuenciado y analizado bioinformáticamente insertos que han permitido la identificación de un nuevo miRNA candidato que hemos denominado egr-miR-new31. Además, se han identificado nuevas isoformas de miRNAs conservados y específicos ya descriptos, aportando mayor evidencia a la existencia de dichos RNAs. La secuenciación y análisis bioinformático de un mayor número de insertos permitirá comparar la expresión de miRNAs a lo largo del ciclo de vida del parásito lo que proveerá nuevas bases para estudiar su desarrollo.