Cultivo celular primario de Echinococcus granulosus: formación de estructuras compatibles con protoescólices

PRADA L; SPILIOTIS M; CUCHER M; BREHM K; ROSENZVIT M

Congreso; XVIII Reunión Científica Anual, Sociedad Argentina de Protozoología; 2009

Cultivo celular primario de Echinococcus granulosus: formación de estructuras compatibles con protoescólices Prada L1, Spiliotis M3, Cucher M, 1Brehm K2, Rosenzvit M1 1Departamento de Microbiología, Facultad de Medicina, UBA, Argentina. 2Universidad de Würzburg, Alemania.3Universidad de Berna, Suiza Echinococcus granulosus es un parásito cestode cuyo estadío larval es responsable de la hidatidosis. Su ciclo de vida involucra dos tipos de hospedadores. En el hospedador definitivo, perro u otros cánidos, se desarrolla el gusano adulto que genera oncosferas. Luego de liberarse al medio, las oncosferas infectan al hospedador intermediario, animales ungulados y eventualmente el hombre, formando el metacestode o quiste hidatídico. A partir de la capa germinal del quiste hidatídico se generan vesículas prolígeras, las cuales a su vez, forman protoescólices que al ser ingeridos por el hospedador definitivo desarrollan parásitos adultos. Si bien el estudio de los parásitos helmintos ha avanzado en las últimas décadas, no se ha podido alcanzar el desarrollo logrado en parásitos unicelulares debido a la complejidad de los ciclos de vida, difíciles de reproducir en el laboratorio, y a la falta de modelos in vitro apropiados. Hasta el momento no existen publicaciones sobre el cultivo celular primario de E. granulosus. Para E. multilocularis, en cambio, ha sido reportado el establecimiento de cultivos celulares primarios a partir de células provenientes del metacestode que, en condiciones reductoras y en co-cultivo con células del hospedador, tienen la capacidad de agregarse y formar vesículas correspondientes al metacestode. El objetivo de este trabajo es establecer un modelo de cultivo in vitro de células primarias de E. granulosus para estudiar su capacidad de desarrollo. Para ello, se disgregaron con tripsina paredes de quistes hidatídicos de origen porcino. Las células obtenidas se cultivaron en condiciones reductoras (batocuproína), con el agregado de insulina humana, y en co-cultivo con distintas líneas celulares: PK15 (células de riñón porcino), RH (células de hepatoma de rata), COS-7 (células de riñón de mono) y HEK (células de riñón de embrión humano). En todos los casos se observó viabilidad celular al menos hasta los dos meses de cultivo y formación de agregados celulares. En el caso de células RH- , a los dos meses de cultivo, estos agregados mostraron una morfología y movilidad compatible con protoescólices inmaduros, a diferencia de lo reportado en cultivos primarios de E. multilocularis. La capacidad de movimiento sugiere la presencia de células musculares y el desarrollo de un sistema nervioso. El modelo in vitro obtenido, es de utilidad para el estudio de las distintas etapas de la formación de protoescólices así como también para el análisis de los factores del hospedador y del parásito involucrados en el desarrollo y la diferenciación celular.