ESTUDIO DE LA INTERACCION DE LA ALBUMINA SERICA Y ANTIBIOTICOS POLIENICOS EMPLEANDO ESPECTROSCOPIA FLUORESCENTE. TERMODINAMICA DEL EQUILIBRIO

AVALLE, GABRIELA; ROMANINI, DIANA; NERLI, BIBIANA; PICO, GUILLERMO

Tucumán

Congreso; X Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 1997

Asociación Argentina de Investigación Fisicoquímica

Fue estudiada la interacción de la albúmina sérica humana(ASH) y bovina (ASB) con antibióticos poliénicos (nistatina y anfotericina B) mediante espectroscopía de fluorescencia. Ambos antibióticos mostraron alta afinidad por la proteína: la Ka medida para anfotericina B fue 5,8 107 M-1 para el primer sitio,  el sitio secundario mostró afinidad dependiiente de la temperatura, la nistatina tiene un sólo tipo de unión con una Ka de 1,1 106 M-1, el coeficiente de Hill aumenta de 1,6 a  20ºC hasta 2,7 a 50 ºC, así como también se observa un aumento de la entropía de unión. Consideramos que ambos ligandos se unen al sitio II dee la albúmina y al de los ácidos grasos . La curva de fluorescencia intrínseca de nistatina unida a ASH y ASB vs. Temperatura permite analizar el efecto de la misma sobre el entorno donde se encuentra el ligando permitiendo concluir que la fijación corresponde a un modelo de dos estados con un Tm de 44,5 ºC para ASB y 48,4 ºC  para ASH. El Tm medido a partie de la fluorescencia nativa de la ASH es mayor que éste (Farruggia et. al., BBActa 1252, 59-68, 1995 ), lo que implica que se está detectando un cambio conformacional local en el sitio de unión. Los resultados indican que nistatina y anfotericina son pruebas ópticas adecuadas para detectar cambios conformacionales lñocales en las proteínas estudiadas