ESTUDIO PRELIMIAR DEL COMPORTAMIENTO DE LACTOFERRINA EN SISTEMAS BIFASICOS ACUOSOS COMO PASO PREVIO A SU BIOSEPARACION DEL SUERO DE LECHE.

BOERIS, VALERIA; MANZUR, ALEJANDRA; ROMANINI, DIANA

Rosario

Congreso; VI Congreso y XXIV Reunión Anual de la Soc. de Biología de Rosario; 2004

Soc. de Biología de Rosario

Lactoferrina  (LF) representa aproximadamente el 1 % del total de las proteínas solubles del suero de leche,  su peso molecular es 80.000, su pI 8,0  y contiene un 12 % de glúcidos en su molécula. Se ha determinado que tiene la propiedad de inhibir el crecimiento bacteriano y de incrementar la capacidad inmunológica del organismo humano. Esto ha inducido a estudiar su  empleo como conservante de  alimentos y en el tratamiento de tumores. Se aisló la LF en nuestro laboratorio a partir del suero de leche, por cromatografía de intercambio iónico en CM Sephadex en un medio de buffer fosfato de sodio 50 mM,  pH 6,5  y mediante la aplicación de gradiente de fuerza iónica de NaCl entre 0,19 - 0,55 M. El objetivo de este trabajo es conocer el  perfil de reparto de LF en sistema bifásicos acuosos de polietilenglicol (PEG) (peso molecular 1000, 1440, 3350, 6000 y 8000)-fosfato (pH 6,5) para aplicar esta metodología a su aislamiento en macroescala a partir de su fuente natural LF mostró tener preferencia por la fase fosfato con un coeficiente de reparto (0,5 a 0,01) que disminuyó con el incremento de la concentración de la proteína y del peso molecular del PEG. El espectro de emisión de fluorescencia de la LF fue pobremente perturbado por PEG de diferentes pesos moleculares, esto sugiere que no hay interacción PEG- LF y está de acuerdo con la afinidad de la proteína por la fase fosfato. La temperatura afectó levemente el reparto de la proteína, siendo los repartos endotérmicos ()H° 1 a 3 kcal/mol) asociados a variaciones positivas de entropía  ()S° 5 a 10 u.e.).             El método se mostró apto para aislar LF, ya que ésta prefiere la fase fosfato (donde se recupera un 60- 80 % según el peso molecular del PEG). Esta fase puede dializarse y concentrarse fácilmente.